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随着商品猪育种技术的不断进步，母猪窝产仔数明显提高，但如何减少母猪产死胎、木乃伊、弱仔及畸形数目，提高仔猪初生重及成活率在生产中具有重要意义。母体通过胎盘向胎儿转运营养物质的种类和数量对胎儿的生长发育起到至关重要的作用。本试验以孕龄11d的SD大鼠为研究对象，在无菌的条件下分离胎盘，通过组织块法与酶消化法相结合的方法获得了纯度高、活力好的胎盘绒毛膜滋养层细胞，经免疫荧光方法鉴定其为目的细胞，在此基础上探讨L-肉碱促进子宫内胎儿生长的作用机制。试验在0％，5％，10％，15％，20％血清培养基中分别添加不同浓度的L-肉碱(0、0.1、1、10、50、100mmol/L)，用MTT法检测L-肉碱对滋养层细胞增殖的作用，从而筛选出最适血清浓度并进行后续试验；然后运用流式细胞术检测不同浓度的L-肉碱对滋养层细胞周期和凋亡的影响；最后，应用实时荧光定量PCR方法检测不同浓度L-肉碱及不同处理时间对滋养层细胞相关基因mRNA表达量的影响。 研究结果如下： 1.以体外培养SD大鼠胎盘滋养层细胞为模型，用MTT法检测L-肉碱对滋养层细胞增殖的作用。结果显示，细胞培养24h时，5％，10％，20％血清组细胞OD值随L-肉碱添加量增加有增大趋势，在L-肉碱添加量为10 mmol/L时达到显著水平(P<0.05)。细胞培养48h时，0％、5％血清组细胞的OD值随L-肉碱添加量的增加而增大，且在L-肉碱的添加量为50mmol/L时细胞OD值显著增大并达到差异水平(P<0.05)。 2.根据MTT法筛选结果，选择试验期为24h的5％血清组为后续试验对象，通过流式细胞术检测细胞周期。结果显示，L-肉碱的添加量为10mmol/L时，G2-M和S期的细胞百分比升高达到显著水平(P<0.05)；添加L-肉碱50mmol/L时，S期细胞百分比达到最大值。L-肉碱添加量为50mmol/L时培养0～4d，用流式细胞仪检测细胞周期发现，G0-G1期细胞百分比随培养时间延长而升高，G2-M期细胞百分比呈先升后降的趋势，S期细胞随培养时间延长而降低。在培养第2天时，G2-M期细胞百分比达到最大值与第3，4天差异显著(P<0.05)。 3.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示，不同L-肉碱处理组坏死、晚凋、早凋细胞百分比随其添加量的增加逐渐降低，正常细胞百分比随其添加量增加逐渐升高且均达到了差异显著(P<0.05)。当L-肉碱添加量为50mmol/L时，正常细胞百分比达到最大值(P<0.05)。由此可知，L-肉碱具有减少早凋细胞的数量达到抑制细胞凋亡的作用。 4.实时荧光定量PCR结果显示：IGF-I、IGF-IR、GLUT3、CAT1表达丰度随L-肉碱添加量增加呈现峰型变化，分别在L-肉碱浓度为10、0.1、0.1、10mmol/L达到最大值。不同L-肉碱处理组GLUT1mRNA表达量随L-肉碱添加量的增大而升高(P>0.05)；SNAT1、SNAT2、SNAT4的mRNA表达量有先升高后降低的趋势，L-肉碱添加剂量达到50mmol/L时SNAT1、SNAT2、SNAT4的mRNA表达量均达到最大值，其中SNAT2与对照组相比差异显著(P<0.05)。 5.相关基因mRNA表达量随时间的变化规律：在L-肉碱添加剂量为50mmol/L的情况下，不同处理时间点(0、12、24、48、72、96h)相比，不同时间处理组IGF-I和IGF-IRmRNA随处理时间延长呈峰型变化，分别在48h和24h时达到最大值。GLUT1和GLUT3的mRNA表达量都有升高趋势，在48h和12h显著上调(P<0.05)。在0～72h，SNAT1、SNAT2和SNAT4mRNA相对表达量呈现出先升高后降低的趋势，且三者均在24h达到最大值(P<0.05)。