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近年来，随着世界经济的飞速发展，环境中出现了越来越多的模拟和干扰动物及人类内分泌机能的物质，这一类物质被称为环境内分泌干扰物。环境雌激素就是内分泌干扰物中的重要一类，主要指那些进入动物或人体后，能对机体内正常内分泌物质的合成、释放、运转、代谢以及结合产生干扰，激活或抑制内分泌系统功能，从而破坏其维持机体稳定性和调控作用的外源性化合物。
目前的研究结果表明，环境雌激素对内分泌系统具有极强的干扰作用，可以导致畸形胎、发育异常、生殖功能障碍、代谢紊乱、癌症等。环境雌激素种类繁多，分布广泛，不仅影响人类健康，也威胁到生物物种的存亡，它主要分为天然雌激素和人工合成雌激素两大类。天然雌激素主要有雌二醇(Estradiol，E<,2>)、雌三醇(Estriol，E<,3>)、雌酮(Estrone，E<,1>)，人工合成的雌激素主要有双酚A(bisphenol A，BPA)、己烯雌酚(diethylstilbestrol，DES)等。雌二醇、雌三醇是是环境中含量最大的两种雌激素；双酚A是塑料工业广泛应用的添加剂，己烯雌酚在医药工业中具有重要应用，它们均具有相当的雌激素毒性。建立环境雌激素的分析检测方法对于研究雌激素类物质的迁移、转化、作用机理等方面具有重要意义，已成为分析化学和环境化学的热门话题。
免疫分析是利用抗原抗体的特异性反应进行分析检测的一项技术，由于抗原抗体反应的高专一性，免疫分析具有较高的灵敏度和选择性，而且具有操作简单、分析速度快、经济方便等优点，已被广泛用于医学检验、农业、环境、食品等行业，显现出了良好的应用前景，被人们称为新世纪最有前途的分析技术之一。本文在完全抗原的制备、多克隆抗体的生产、免疫分析方法的建立方面展开工作，结合半导体纳米粒子，荧光分析方法等研究热点，建立了雌二醇、雌三醇、双酚A、己烯雌酚的免疫分析方法。这些方法对推动新型环境监测方法的研究和应用具有一定的理论和现实意义。
本文主要包括以下几部分：
一、双酚A、己烯雌酚多克隆抗体的制备
双酚A、己烯雌酚是半抗原小分子，具有免疫反应性，但没有免疫原性。本文将双酚A的衍生物-4，4-双(4-羟基苯基)戊酸与载体蛋白牛血清白蛋白结合合成了双酚A的完全抗原；将制备的己烯雌酚衍生物-己烯雌酚单羧甲基醚与载体蛋白牛血清白蛋白结合制备了己烯雌酚完全抗原。利用完全抗原免疫健康的家兔，制备出了雌激素的抗血清，将抗血清分离纯化后得到了可以用于免疫分析的多克隆抗体。
二、CdS量子点标记抗雌二醇抗体荧光免疫试剂
在水相中制备了CdS纳米晶，该纳米晶具有较好的荧光发射性能，将其与抗雌二醇抗体偶联，得到了CdS纳米晶标记的抗雌二醇抗体标记物，该标记物仍具有良好的荧光特性。把合成的标记试剂初步用于雌二醇的免疫分析，线性范围为0.20-8.0μg/mL，相关系数为R=0.9884，用于雌二醇的分析检测，效果良好。为CdS纳米晶作为标记试剂用于环境及生物样品中雌二醇的荧光免疫分析提供了实验基础。
三、原子吸收免疫分析方法测定雌三醇
在水相中合成了ZnS量子点并用其标记抗雌三醇抗体，利用制备的标记试剂建立了首次应用原子吸收分析方法做为检测手段的雌三醇竞争免疫分析新方法。利用建立的方法对样品中的雌三醇进行了测定。测定雌三醇的线性范围为40.0-600.0 ng/mL，线性方程为A=0.821-0.0591gC(A为原子吸收强度，C为雌三醇浓度)，线性相关系数为R=0.9945，利用建立的方法对血清中的雌三醇进行了测定，效果良好。
四、荧光免疫分析方法测定双酚A
以异硫氰光素(FITC)标记的羊抗兔抗体作为分析试剂，利用完全抗原包被酶标板，建立了双酚A的竞争荧光免疫分析方法并对包被抗原浓度、抗体浓度、缓冲体系pH值等条件进行了优化。利用建立的方法对水样中的双酚A进行了测定，测定的线性范围为10-2000 ng/mL,回归方程为I=45355-927.08 lnC<,BPA>(I为荧光强度，C为双酚A浓度)，相关系数为R=0.9953，用于水样中双酚A的测定，效果良好。
五、荧光免疫分析方法测定己烯雌酚
以异硫氰光素(FITC)标记的羊抗兔抗体作为分析试剂，利用己烯雌酚多克隆抗体包被酶标板，建立了己烯雌酚的荧光免疫分析方法并对包被抗原浓度、抗体浓度、缓冲体系pH值等条件进行了优化。利用建立的方法对样品中的己烯雌酚进行了测定，测定的线性范围为0.1-1000ng/mL，I=36621.2344.71gC<,DES>(I为荧光强度，C为己烯雌酚浓度)，相关系数为R=0.9912，该方法用于鸡肉中己烯雌酚的测定，效果良好。