【摘 要】
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该实验室筛选到一株高产Gamma-亚麻酸(GLA)的菌株--深黄被包霉M6-22(Mortierella isabellina),GLA有广泛的医疗作用,被用作食品添加剂.在Delta 6-脂肪酸脱氢酶(D6D)的催化下,
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该实验室筛选到一株高产Gamma-亚麻酸(GLA)的菌株--深黄被包霉M6-22(Mortierella isabellina),GLA有广泛的医疗作用,被用作食品添加剂.在Delta 6-脂肪酸脱氢酶(D6D)的催化下,亚油酸转变为GLA,并且D6D是脂肪酸合成中的限速酶.为了能克隆到M6-22的D6D基因,该文做了一些前提性和关键性的工作.首先,通过Northern杂交的方法,证明兰细菌D6D与M6-22D6D的同源性较低,难以作为探针筛选M6-22的D6D基因;其次,通过比较脱氢酶的保守序列,合成简并引物,以M6-22的总RNA为模板,通过反转录PCR(RT-PCR)的方法扩增脱氢酶序列,将PCR产物克隆在E.coli中,酶切筛选合适大小的外源片段,测序在确定探针.
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