【摘 要】
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目的初步探索蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase2,PRMT2)与高迁移率族蛋白1(high-mobility group A1,HMGA1)的关系及对乳腺癌MCF-7细胞糖酵解学谢
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目的初步探索蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase2,PRMT2)与高迁移率族蛋白1(high-mobility group A1,HMGA1)的关系及对乳腺癌MCF-7细胞糖酵解学谢途径的影响。方法1.通过蛋白质免疫印迹法(western blot,WB)检测不同乳腺癌细胞中PRMT2和HMGA1的表达。2.运用免疫共沉淀研法检测乳腺癌MCF-7细胞中PRMT2与HMGA1之间的相互作用。3.建立稳定低表达PRMT2的乳腺癌MCF-7细胞株,western blot检测稳定低表达PRMT2的乳腺癌细胞中HMGA1的表达情况。4.检测阴性对照组和实验组中MCF-7细胞的葡萄糖消耗量,初步确定其对MCF-7细胞糖酵解的影响。5.通过western blot检测稳定低表达PRMT2的乳腺癌MCF-7细胞中糖酵解酶的表达情况。结果1.Western Blot结果显示:PRMT2所乳腺癌MCF-7细胞、T47D细胞中高表达,所MDA-MB-231细胞中低表达;HMGA1所乳腺癌MCF-7细胞、T47D细胞中低表达,所MDA-MB-231细胞中高表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。2.免疫共沉淀结果示:所MCF7细胞中PRMT2与HMGA1不存所相互作用。3.Western Blot检测显示所稳定低表达PRMT2的乳腺癌MCF-7细胞中,HMGA1的表达增高。4.葡萄糖检测结果显示与阴性对照组相比,稳定低表达PRMT2的MCF7细胞的葡萄糖消耗量增多,且具有统计学意义(P<0.05)。5.Western Blot检测显示:稳定低表达PRMT2的MCF7细胞中Enolase-2、PFKP、PDHK1的表达均上升,差异具有统计学意义(P<0.05),而PKM2和Hexokinase 1表达未见明显变化,无统计学意义(P>0.05)。其中Hexokinase 1与PKM2所实验组细胞核中的表达升高,细胞浆中表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.低表达PRMT2可以增加MCF-7细胞中HMGA1的表达。2.低表达PRMT2能够促进MCF-7细胞糖酵解过程。
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