在高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)中利用基因枪法转化OSISAP1基因的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:suyi0911
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
逆境胁迫是对植物生存的一个严重威胁,植物面对逆境胁迫有其自身的应答调节机制。分子生物学的发展以及生物技术的应用,为人们研究植物的抗逆分子机理提供了理论依据和研究方法。目前人们已经发现了许多与逆境胁迫相关的基因,通过基因工程的办法,过量表达这些基因,使转基因植株增强了对逆境的抗性。高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb.)是一种倍受青睐的优质草坪草,高羊茅的育种一直是人们研究的热点,本实验旨在借助基因工程技术,转入一个调控基因,使其在高羊茅中过量表达,以期待获得抗逆性增强的转基因高羊茅植株。 实验克隆了粳稻(Oryzasalivasub.)秋光的锌指蛋白OSISAP1基因,构建不同标记的两个植物表达载体,一个载体是pGreen0229-CaMV35S-OSISAP1-DHA,DHA标记便于免疫印迹的检测,另一个载体是pGreen0229-CaMV35S-OSISAP1-GFP,GFP标记可用于检测绿色荧光,经测序和酶切验证,获得正确的植物表达载体。植物材料采用高羊茅品种交战Ⅱ号,实验建立了高羊茅下胚轴诱导胚性愈伤组织及其再生体系。以基因枪法转化高羊茅胚性愈伤组织,除草剂草丁膦(2mg.L-1PPr)筛选转化的愈伤组织,最终获得再生植株156个。经PCR检测,有26个转DHA标记载体的阳性植株,有37个转GFP标记载体的阳性植株,并且叶片涂抹PPT(2mg.L-1PPT),转基因叶片有明显的除草剂抗性。免疫印迹杂交检测到目的蛋白杂交条带很微弱,激光共聚焦显微镜检测到明显的绿色荧光,绿荧光蛋白的存在说明目的基因已经整合到高羊茅基因组中,并在转基因植株中得到表达。
其他文献
“哎哟!”龙小伊正趴在桌上看书,突然被一块小石头砸中了头.rn“谁?”rn龙小伊回过头,看见金乌站在一个高高的柜子上,正恶狠狠地盯着自己.rn“金乌?”龙小伊被盯得心里发毛,
期刊
Two-dimensional (2D) organic nanomaterials are fascinating because of their unique properties and pentential applications in future optoelectronic devices.Polya
期刊
定点单分子DNA芯片可以使单位面积数据量最大化,在单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)、基因拷贝数变异(Copy number variations,CNV)检测、比较基因组杂交(Compa
Most of the schemes for generating isolated attosecond pulses (IAP) are sensitive to the carrier-envelope phase (CEP) of the driving lasers.We propose a scheme
大家肯定知道“吝啬”是用来形容人小气的词语,却不一定知道“吝”和“啬”竟是两个人的名字.rn一天,吝先生遇到啬先生,两人相约于中秋节到乌有山的子虚亭饮酒赏月,并商议由
期刊
The collective motion of rounded squares with different coer-roundnessζ is studied by molecular dynamics (MD) simulation in this work. Three types of translati
In this work, we investigate the electrical transport property and electronic structure of oxide heterostructure LaCrO3/SrTiO3 (111). The interface grown under
长期的进化使植物演化出一套对环境胁迫感知和反应的能力,这种感知和反应的根本基础就是植物的逆境信号传递,而信息传递的核心机制又在于由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化的可逆蛋白