抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体对大鼠实验性牙周炎的治疗作用

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目的观察并评价特异性抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体(IgY)体外抑制牙周主要致病菌牙龈卟啉单胞菌生长和减轻牙周组织炎症程度的作用;为免疫防治慢性牙周炎探索新的解决途径。方法将提出纯化出的抗牙龈卟啉单胞菌-IgY稀释成2mg/ml,1mg/ml,0.5mg/ml,0.25mg/ml,0.125mg/ml和0.0625mg/ml 6个浓度,厌氧环境培养牙龈卟啉单胞菌国际标准菌株ATCC 33277,分别采用微量稀释法和纸片扩散法测定抗牙龈卟啉单胞-IgY的最小抑菌浓度和抑菌圈直径大小,评价抗牙龈卟啉单胞菌-IgY体外抑菌的能力;采用双层丝线结扎加牙龈卟啉单胞菌接种同时辅以高糖饮料的方法在7周内建立大鼠的实验性牙周炎模型,分为抗牙龈卟啉单胞菌-IgY组、米诺环素组、PBS组、模型组和空白对照组5组,待牙周炎模型形成后按实验分组情况分别给予治疗,记录实验期间大鼠体重、一般情况和探诊深度、龈沟出血指数、松动度等牙周临床指标的变化,每3天治疗一次,连续治疗4周后处死动物取出上下颌骨,截取实验牙位进行固定、脱矿、包埋、切片并行HE染色,观察抗牙龈卟啉单胞菌-IgY治疗的实验牙位在组织学上的变化,并比较抗牙龈卟啉单胞菌-IgY和临床常用抗菌药物米诺环素在治疗效果上是否存在差异,评价抗牙龈卟啉单胞菌-IgY抑制慢性牙周炎、改善牙周组织炎症的作用。实验数据采用配对t检验进行统计分析(SPSS 10.0),P<0.05表示存在统计学差异。结果经比较在不同浓度共培养下的菌液的OD值可测定抗牙龈卟啉单胞菌-IgY的最小抑菌浓度为0.5mg/ml;最大抑菌圈直径可达15.16±0.33mm。在动物实验中,大鼠生命体征平稳,无明显的毒副反应。分组治疗后,抗牙龈卟啉单胞菌-IgY组和PBS对照组的各项牙周临床指标统计结果均存在显著性差异(P<0.05);和米诺环素组的各项牙周临床指标在统计学上无显著性差异(P>0.05),两者在治疗后牙周临床症状均得到明显改善,牙龈色形质逐渐恢复正常,松动度减小,提示了抗牙龈卟啉单胞菌-IgY可取得与米诺环素相似的临床治疗效果;病理学切片染色结果表明经抗牙龈卟啉单胞菌-IgY治疗后,牙周组织的炎症得到了控制并存在一定的组织修复反应。结论抗牙龈卟啉单胞菌-IgY在体外可获得良好的抑菌效果,用于实验动物口腔内可明显改善实验牙位的牙周炎症,且不会对受试对象产生毒副反应,是一种安全、有效的生物制剂。该种抗体在免疫防治牙周炎方面具有良好的发展前景。
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