姜黄素前体药物FM0806-1的体内外抗肿瘤作用及其在体肠吸收行为的研究

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研究背景:姜黄素(Curcumin,Cur)是从姜科植物姜黄中提取的酚性有效成分,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗真菌及抗肝毒等多种药理作用,具有良好的临床应用潜力。但姜黄素水溶性差,首过消除现象明显,生物利用度低,成为限制其临床应用的主要因素和产业化的瓶颈。因此为改善姜黄素药代动力学特征,提高其体内抗癌活性,我们对其进行结构修饰,设计合成了姜黄素前体药物FM0806-1。实验室前期研究结果显示FM0806-1的药代动力学特性明显优于Cur,本文将进一步研究FM0806-1对体外培养的肿瘤细胞和动物移植性肿瘤的抑制作用,初步探讨其作用机制,并研究FM0806-1在在体大鼠小肠的吸收情况。研究目的:本研究观察FM0806-1的体内和体外抗肿瘤作用;FM0806-1在大鼠小肠各部位的吸收情况。研究方法:(1)MTT法体外检测FM0806-1对SW1116细胞的影响;(2)运用血清药理学原理,MTT法观察含药血清对SW1116细胞增殖的抑制作用;(3)应用光学显微镜观察细胞形态变化;(4)采用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化;(5)应用Western blot法检测含药血清对细胞中相关蛋白表达的影响;(6)应用小鼠移植性实体瘤H22、S180的治疗试验观察FM0806-1的体内抗肿瘤活性;(7)应用人淋巴瘤CA46裸鼠移植瘤模型进行体内实验,观察FM0806-1的体内抗肿瘤活性;(8)应用在体肠回流法考察FM0806-1在在体大鼠小肠的吸收方式,并采用HPLC法进行浓度测定。研究结果:(1)FM0806-1在高达100μg/ml的浓度对SW1116细胞仍无细胞毒作用;(2)制备的含药血清稀释5-40倍后对SW1116细胞仍具有显著的抑制作用,并呈剂量依赖性;并能使细胞形态发生明显变化;(3)FM0806-1含药血清能有效上调Hsp70、Bax蛋白表达,下调Hsp90、Erk1/2、P-Erk1/2蛋白表达,并成剂量依赖性;(4)该药25-100mg/kg两天口服给药一次,均显著抑制小鼠H22、S180实体瘤的在体生长,且显著高于等摩尔姜黄素给药组(P<0.01);(5)该药40mg/kg两天口服给药一次对人淋巴瘤CA46裸鼠移植瘤模型,有显著的抑瘤率(P<0.05);(6)pH值为6.8时,FM0806-1在各个肠段均有一定单位的物理吸附量;三种不同的pH条件下,FM0806-1在各个肠段均有不同程度的吸收。结论:(1)FM0806-1在体外无细胞毒作用,在体内可释放出高浓度的姜黄素,是一个具有良好前景的姜黄素前体药物。(2)在体实验表明,FM0806-1具有很强的体内抗癌活性,且明显优于母体化合物。但其有一定程度的肠段吸附能力,故其剂型有待于进一步的优化。
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