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目的: (1)运用免疫组化二步法检测结直肠癌原发灶及转移灶中VEGF的表达特点,检测三期结直肠癌原发灶及淋巴结转移灶中VEGF与微血管密度的关系。 (2)对比研究结直肠癌原发灶和淋巴结转移灶内间质癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)与血管MVD的表达规律,探讨肿瘤间质微环境的异质性及区域淋巴结内转移的机制和机体的相关反应。 方法:采用免疫组化二步法检测50例为伴有区域淋巴结转移的结直肠癌原发灶与转移灶及27例无区域淋巴结转移结直肠癌中VEGF的表达特点,分析三期结直肠癌原发灶及淋巴结转移灶中VEGF与微血管密度的关系,检测由α-SMA单抗标记的癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)的数量,及由CD31单抗标记的血管计数MVD的数量表达情况。统计学定性资料分析采用X2检验,定量资料分析采用t检验,所选样本资料均获手术治疗,术前未行放、化疗等辅助治疗。 结果: (1)经免疫组化检测CD31,在二期原发灶,三期原发灶和三期转移灶中均能检测到MVD。其数量分别为(36.04±14.18),(56.24±21.60),(44.86±15.78),其中三期原发灶MVD的数量显著高于二期原发灶(t=4.370,P=0.000);三期原发灶MVD的数量显著高于三期转移灶(t=3.001,P=0.003),三期转移灶中的MVD的数量高于二期原发灶,差异有统计学意义(t=2.426,P=0.017)。 (2)经免疫组化检测,在二期原发灶,三期原发灶及三期转移灶中均有大量VEGF表达,其中二期原发灶阳性率为51.8%(14/27),三期原发灶阳性率为82.0%(41/50),三期转移灶阳性率为78.0%(39/50),其中,三期原发灶及三期转移灶中VEGF表达显著高于二期原发灶,差异有统计学意义(X2=21.861,P=0.000;X2=17.383,P=0.000),而VEGF的表达在三期原发灶和转移灶间差异无显著性(X2=0.424,P=0.517)。 (3)经免疫组化检测,在二期原发灶,三期原发灶及三期转移灶中均有大量CAFs,其数量分别为(49.07±15.72),(81.88±15.03)和(62.54±15.01),其中三期原发灶中CAFs的数量显著高于二期原发灶(t=8.995,P=0.000);三期原发灶中CAFs的数量显著高于三期转移灶(t=6.438,P=0.000),三期转移灶中的CAFs的数量高于二期原发灶,差异有统计学意义(t=3.696,P=0.000)。 (4)经相关性分析三期结直肠癌原发灶及淋巴结转移灶中VEGF与MVD的关系发现,三期原发灶内MVD与VEGF表达的半定量分值间呈正相关(r=0.4237,P<0.05);转移灶内MVD与VEGF表达的半定量分值间无明显相关性(r=0.084,P>0.05)。 结论: (1)结直肠癌原发灶内MVD与VEGF的表达呈正相关,转移灶中MVD与VEGF的表达无明显相关性,因此可能提示结直肠癌的原发灶与淋巴结转移灶间血管生成能力不同,其中三期原发灶肿瘤血管生成活性可能高于二期原发灶和三期转移灶。 (2)结直肠癌原发灶与淋巴结转移灶间CAFs、MVD的数量不同,其中三期原发灶中CAFs与MVD的数量显著高于三期转移灶,从而可能提示肿瘤间质微环境具有异质性,因此在诊治结直肠癌患者时应该考虑到肿瘤间质微环境的异质性。