复方人参合剂工艺及其抗肝癌作用研究

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恶性肿瘤的防治仍是目前世界性难题。肝癌是发病率较高的恶性肿瘤之一,其特点为发病隐匿、发现晚、治愈差,使其病死率居高不下,并呈逐年上升趋势。目前中药抗肿瘤的研究已成为热点,且多集中于单味中药方面的研究,人参、鹿角脱盘、麦冬、黄芪均具有抗肿瘤作用,但这4种中药配伍及其抗肝癌H22肿瘤作用如何尚未见报道。本实验通过对这4种中药进行配伍成复方人参合剂,首先以人参皂苷为依据优化复方人参合剂提取工艺;其次以感官评分为标准优化复方人参合剂成型工艺;再次采用HPLC法、苯酚-硫酸法测定复方人参合剂中人参皂苷、水溶性糖、氨基酸等有效成分的含量,制定复方人参合剂质量标准;最后评价复方人参合剂的抗肿瘤功效、机理及其安全性评价,实验结果如下:1、复方人参合剂最佳提取工艺:温度为100℃、料液比为1:31、煎煮时间为160min。2、复方人参合剂最佳成型工艺:复方人参15g/50mL、果糖24.9g/50mL、可拉胶1.5g/50mL,此配方呈棕黄色,色泽均匀,形态饱满,口感甜度适中,咀嚼性好。3、复方人参合剂中检测到了15种人参皂苷和16种氨基酸。复方人参合剂以人参原粉单味生药量计,人参皂苷加和值明显高于单味药组(P<0.05),Rg2、Rh4、Rg3、Rg5、CK等5种稀有皂苷的含量明显升高(P<0.05),人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rc、Rd的含量明显降低(P<0.05),水溶性糖、必需氨基酸、药用氨基酸和总氨基酸的含量明显升高(P<0.05)。以人参原粉单味生药量计,与人参原粉组相比,复方人参合剂中必需、药用及总氨基酸的含量分别为19.66%、44.01%、73.85%(P<0.05);以鹿角脱盘原粉单味生药量计,与鹿角脱盘原粉组相比,复方人参合剂中必需、药用及总氨基酸的含量分别为9.83%、22.01%、36.93%(P<0.05)。4、高剂量复方人参合剂组可以明显抑制肿瘤的生长,提高脾脏和胸腺指数(P<0.05),并促进肿瘤细胞早期凋亡率和总凋亡率(P<0.05),增加IgG、IgE、IgM 3种免疫球蛋白含量(P<0.05)、IL-2、IL-6、IL-12、IFN-γ、TNF-α等5种细胞因子的含量(P<0.05),降低TGF-β细胞因子的含量(P<0.05)。与模型组相比,HE染色结果显示各给药组肿瘤组织被破坏,细胞排列疏松,形状不规则,可见坏死灶,脾脏细胞白髓结构趋于正常,边缘区可辨,淋巴细胞排列密集,证明复方人参合剂对免疫器官具有一定保护作用,而5-FU对小鼠的脾脏组织破坏严重。复方人参合剂可能通过改善机体免疫力,从而发挥其抗肿瘤作用。5、复方人参合剂安全可靠。
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