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目的:涎腺腺样囊性癌是口腔颌面部常见恶性肿瘤,由于该肿瘤恶性程度高、侵袭性强,常常沿着神经扩散或侵入血管造成血行性转移,国内外很多学者已经进行了广泛深入的研究。而腺样囊性癌组织具体营养供应方式还不清楚。以往认为新生血管生成是其唯一血液供应方式。Folkman于1971年提出新生血管是实体肿瘤生长和转移的病理基础,而临床中应用血管生成抑制剂不能完全抑制恶性肿瘤生长。
在临床工作和基础研究中采用血管生成抑制剂不能完全抑制肿瘤生长,那么肿瘤细胞生长过程中必然还有其他的营养供应模式。血管生成拟态(vasculo-genic mimicry VM)是1999年Maniotis等在研究高度恶性黑色素瘤时发现的。它是一种不依赖于血管内皮细胞、全新的肿瘤组织内血液供应模式,它的特点是血液管道内没有内皮细胞的参与。1999年,Maniotis等在对眼葡萄膜色素瘤研究时发现一种病理现象:黑色素瘤细胞互相连接,形成规律的袢环状结构,但是黑色素瘤细胞的周围是由过碘酸席夫(periodic acid-schiff reagent,PAS)染色阳性的细胞外基质包绕,这种结构中可以见到红细胞,通过血管造影证实其结构为血管样结构,并认为这种结构为实体恶性肿瘤获得血液供应的另外一种途径,类似胚胎期血管形成(vasculogenesis)样途径,并将其命名为vasculogenic mimicry,中文名暂译为血管生成拟态。他们的发现引起了许多学者的关注,成为近年来肿瘤学研究新的热点。血管生成拟态在许多肿瘤细胞的体内及体外实验中得以证实。
目前为止临床上涎腺腺样囊性癌的早期发现及诊断仍然存在困难,由于不能早期发现肿瘤而延误了最佳治疗时机,往往发现肿瘤时肿瘤已经侵犯周围正常组织或已经转移,治疗效果较差,给患者造成巨大伤害及经济损失,也浪费了大量医疗上的人力物力资源。涎腺腺样囊性癌是高度恶性肿瘤,以往研究认为新生血管是肿瘤生长的唯一的血液供应方式,而临床工作中发现单纯抑制血管生成不能完全治愈肿瘤,那么它的生长必然存在其它的血液供应方式。而目前血管生成拟态被认为是高度恶性肿瘤生长的一种新的营养供应方式。而到目前为止国内外还没有关于涎腺腺样囊性癌肿瘤组织中是否存在血管生成拟态的报道。本课题主要探讨并证明涎腺腺样囊性癌组织中存在血管生成拟态(VM),并观察其组织病理变化。本研究同时探讨三氧化二砷能否抑制血管生成拟态的形成并通过试验作用于裸鼠腺样囊性癌体外模型中,观察其抑制VM结构特点。
方法:本课题首先进行涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M进行复苏传代,然后进行细胞计数。然后按照1×107/ml浓度进行裸鼠臀部皮下注射,裸鼠是在SPF级饲养时喂养。每日观察并记录裸鼠上肿瘤生长情况。本实验40只裸鼠全部荷瘤。当肿瘤长至约直径2mm时分出20只裸鼠并分成两组即高剂量组与低剂量组。于腹腔内每日注射三氧化二砷注射液。剂量分别为2.5 mg/kg.d和5.0 mg/kg.d。其余20只继续饲养。当肿瘤长至直径约5-10mm时处死裸鼠切取标本并分别固定于10%甲醛溶液和戊二醛内固定保存,留作HE染色和CD31染色还有电镜标本使用。
结果:经HE染色和CD31染色证明组织结构中存在血管生成拟态结构。并电镜下观察该结构特点。注射三氧化二砷的裸鼠肿瘤得到明显抑制,肿瘤体积变化与对照组差别有统计学意义。注射三氧化二砷的裸鼠标本中无VM结构并观察其病理变化。
结论:涎腺腺样囊性癌病理结构中存在血管生成拟态;三氧化二砷能够抑制VM形成。