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一、ATP敏感性钾通道对大鼠前脂肪细胞增殖分化影响目的:探讨ATP敏感性钾通道在大鼠前脂肪细胞增殖分化中作用。方法:逆转录PCR检测大鼠脑组织、脂肪组织、前脂肪细胞和诱导5天获得的脂肪细胞中ATP敏感性钾通道磺脲类受体mRNA (SURmRNA)亚型,实时定量PCR检测前脂肪细胞和诱导5天获得的脂肪细胞中SURmRNA表达;ATP敏感性钾通道阻滞剂格列本脲和激动剂二氮嗪作用于前脂肪细胞,实时定量PCR检测SURmRNA表达,MTT检测前脂肪细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布;油红O染色法检测细胞内脂质含量,Image-Pro plus5.0软件测量细胞直径。结果:大鼠脑组织中有SUR1mRNA、SUR2mRNA表达,大鼠脂肪组织、前脂肪细胞和诱导5天获得的脂肪细胞中均有SUR2mRNA表达,而无SUR1mRNA表达,且脂肪细胞中SUR2mRNA表达明显高于前脂肪细胞;格列本脲抑制前脂肪细胞SUR2mRNA表达,呈剂量依赖性地促进前脂肪细胞增殖,增加G2/M+S期细胞百分率,增加细胞脂质含量,使脂肪细胞直径增大;二氮嗪在这些方面的作用与格列本脲相反。结论:ATP敏感性钾通道在前脂肪细胞增殖分化中可能起调节作用。二、ATP敏感性钾通道调节大鼠前脂肪细胞增殖分化机制研究目的:探索ATP敏感性钾通道调节大鼠前脂肪细胞增殖分化机制。方法:ATP敏感性钾通道特异性激动剂(二氮嗪)、阻滞剂(格列本脲)作用于前脂肪细胞诱导分化5天后,逆转录PCR检测瘦素mRNA表达及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达。二氮嗪、格列本脲作用于前脂肪细胞一天,Western blot检测其细胞内P21、P27蛋白表达。结果:前脂肪细胞分化过程中,二氮嗪组瘦素mRNA表达明显增加(p<0.05),格列本脲组瘦素mRNA表达明显降低(p<0.05);格列本脲组PPARγmRNA表达增加(p<0.05),而二氮嗪组PPARγmRNA表达减少(p<0.05)。二氮嗪作用于前脂肪细胞,使细胞内P21、P27表达增高(p<0.05),而格列本脲作用于前脂肪细胞后,细胞内P21、P27表达降低(p<0.05)。结论:ATP敏感性钾通道调节大鼠前脂肪细胞增殖分化,可能与瘦素mRNA、P21、P27蛋白表达上调,PPARγmRNA表达下调有关