桑黄菌发酵菌粉及其组分抗小鼠移植性肝癌H作用的研究

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桑黄(Phellinus igniarius(L.ex.Fr)Quel),是一类具有重要药用价值的大型真菌,最早收载于李时珍《本草纲目》中。由于桑黄天然子实体稀少,人工栽培困难,目前采用液体发酵生产。本论文对液体发酵所得桑黄菌发酵菌粉(DMCB)行了成分分析并与子实体进行了分析对比,并采用荷瘤小鼠肝癌H22模型,研究了发酵菌粉及其各提取物组分的抗肝癌作用,并对其可能的机制进行了初步探讨。结果表明桑黄菌发酵菌粉营养丰富,含有蛋白25.73%,氨基酸14.50%,粗多糖28.55%。不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚油酸,油酸为主。还含有丰富的多糖、三萜类化合物、酚类物质等。桑黄菌发酵菌粉在很多方面已经达到或超过了桑黄子实体,与子实体相比,同样具有较高营养价值和开发价值。研究表明桑黄菌发酵菌粉及其各提取物组分对荷瘤小鼠肝癌H22都具有一定的抗肿瘤作用,其中,桑黄菌发酵菌粉及其组分II(桑黄多糖组分)具有显著的抗肿瘤作用,高剂量抑瘤率分别为33.5%和40.3%。桑黄菌发酵菌粉及其各提取物组分组与模型组相比对胸腺指数有显著影响,而对的脾脏指数影响却并不明显,但数值上都低于正常组水平。病理切片可以看出,在高剂量的菌粉、多糖作用后,肿瘤细胞呈团弥漫性分布,与模型组相比坏死细胞明显增多。同时,免疫组化检测也表明桑黄菌发酵菌粉及其多糖组分能明显的降低瘤组织中bcl-2基因蛋白的表达,提高小鼠瘤组织中的bax基因蛋白的表达。与模型组相比,桑黄菌发酵菌粉及其多糖组分能明显的提高小鼠肝脏中的SOD、CAT、GSH-Px酶的活性。气相色谱分析各主要单糖组成及质量分数分别为:红外光谱分析结果显示,该工艺条件下提取的桑黄菌菌粉多糖产品中富含葡萄糖,且糖苷键主要是α-型。药效研究表明桑黄菌发酵菌粉三个组分中,多糖组分具有最显著的抗肿瘤活性。试验采用响应面法对其提取工艺进行了优化,得到桑黄菌发酵菌粉多糖提取的理想工艺条件为:温度为84℃,提取时间为2.7 h,液料比为33.5: 1。桑黄菌发酵菌粉多糖的预测提取率达到24.90%。桑黄菌发酵菌粉多糖的主要单糖组成及质量分数分别为:甘露糖3.65%,葡萄糖12.00%,半乳糖0.24%。多糖产品中含有酸性多糖,糖苷键主要是α-型。
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