【摘 要】
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目的：研究氯通道在双硫仑诱导的人急性淋巴母细胞白血病Molt4细胞凋亡中的作用。方法：1)膜片钳技术记录全细胞电流；2)活细胞实时成像技术分析和测量细胞体积变化；3) Hoechst核染
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目的：研究氯通道在双硫仑诱导的人急性淋巴母细胞白血病Molt4细胞凋亡中的作用。方法：1)膜片钳技术记录全细胞电流；2)活细胞实时成像技术分析和测量细胞体积变化；3) Hoechst核染色法观察细胞膜通透性；4)流式细胞术检测凋亡。结果：1)47%低渗刺激作用于Molt4细胞可激活一个具有明显外向优势的容积敏感氯电流,并且可以被氯通道阻断剂阻断；2)47%低渗刺激引起的细胞肿胀可诱发Molt4细胞产生调节性细胞容积减小(regulatory volume decrease, RVD),这一容积调节过程可被氯通道阻断剂NPPB部分阻断；3) Molt4细胞在等渗环境中存在氯通道的活动,产生容积敏感背景氯电流。氯通道阻断剂可抑制此电流并导致细胞容积增大(肿胀)；4)联合应用抗酗酒药双硫仑(Disulfira)和氯化铜可激活Molt4细胞氯通道,产生容积敏感的氯电流,并诱发凋亡性细胞容积减小(Apototic Volume Decrease, AVD)。双硫仑／氯化铜激活的氯电流以及诱发的AVD过程可被氯通道阻断剂NPPB所阻断；5) Hoechst33258染色显示,双硫仑／氯化铜可使细胞膜通透性增高(膜透化),这一作用可被NPPB阻断；6)流式细胞术检测表明,双硫仑／氯化铜可诱导Molt4细胞凋亡,氯通道阻断剂NPPB可部分阻断其作用。结论：1) Molt4细胞表达容积敏感性氯通道；2)容积敏感性氯通道参与低渗和等渗状态下的Molt4细胞容积调节,以及正常细胞容积的维持；3)容积敏感性氯通道可能通过AVD或者膜透化而参与双硫仑／铜诱导的Molt4细胞凋亡。
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