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实验目的:通过考察三子养亲汤对哮喘模型大鼠Th1、Th2细胞因子IL-4、IFN-γ含量及其转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达水平的影响,探讨三子养亲汤改善哮喘症状的药效学机制。实验方法:1、大鼠哮喘模型的构建:本实验采用卵蛋白和氢氧化铝致敏构建大鼠哮喘模型。分为致敏和激发两个阶段,大鼠于第1天和第14天腹腔注射1ml10%卵蛋白（OVA）100mg和氢氧化铝100mg的无菌混悬液致敏;于14-28日用1%卵蛋白生理盐水5ml混悬液超声雾化30min/d,以此来建立哮喘模型。2、分组及药物干预:将60只SD雄性大鼠随机分成6组,每组各10只,分别为空白对照组（Con组）、哮喘模型组（Ast组）、三子养亲汤低剂量组（SZ-L组）、中剂量组（SZ-M组）、高剂量组（SZ-H组）、地塞米松组（Dex组）。除空白对照组外,其余各组均采用卵蛋白和氢氧化铝致敏构建大鼠哮喘模型。空白对照组于相同造模时间段腹腔注射1ml生理盐水,及雾化吸入0.9%生理盐水5ml。各组大鼠从激发第一天开始给予灌胃,SZ-H组、SZ-M组、SZ-L组分别以25g·kg-1·d-1、12.5g·kg-1·d-1、6.5g·kg-1·d-1灌胃,Dex组以0.068mg·kg-1·d-1药量1ml灌胃。实验过程中特别是激发阶段注意观察大鼠行为学改变。3、相关因子检测:各组大鼠于末次激发24h后采集血清、肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺组织标本。肺组织采用苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE）染色,观察肺组织病理学改变;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清及肺泡灌洗液中的IL-4,IFN-γ含量;运用逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测其转录因子T-bet mRNA、GATA-3mRNA表达水平。实验结果:1.一般情况:空白组大鼠形体壮硕,反应灵敏,活动自如,皮毛光滑柔顺,食量正常,体重逐渐增加。模型组大鼠于第7天开始出现精神状态变差,第14天出现精神明显萎靡,反应迟钝,呼吸急促,烦躁,易激惹,抓鼻,打喷嚏等症状,进食量较正常组减少,体重増长缓慢。其余各给药组大鼠精神较好,反应较为灵敏,呼吸较平稳,皮毛光泽度良好。随时间的推进,活动量、进食量下降等程度均有不同程度的改善。2.病理形态学:正常组:肺泡结构正常,支气管粘膜上皮无脱落、变形,未见炎性细胞聚集与腺体増生,无炎性渗出。哮喘模型组:支气管粘膜出出现大量上皮细胞脱落、变形,见较多的炎性细胞集聚,管壁増厚,杯状细胞增生,部分支气管上皮细胞排列不完整。肺外观体积増大,表面略肿胀,有不规则暗红色充血区,支气管壁及支气管周围组织有炎性细胞浸润。与模型组相比,各给药组的肺泡炎症有不同程度的改善。3.肺泡灌洗液（BALF）和血清中IL-4、IFN-γ的含量:（1）与空白对照组相比哮喘模型组BALF和血清中IL-4含量明显增高,差异有显著统计学意义（P<0.01）;BALF及血清中IFN-γ的浓度明显降低,差异显著有统计学意义（P<0.01）;（2）与模型组相比各用药组血清及肺泡灌洗液中IL-4含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;（3）与地塞米松组相比,三子养亲汤高剂量组无统计学意义（P>0.05）;（4）三子养亲汤各剂量组相比,高剂量组血清及肺泡灌洗液中IL-4含量显著低于中低剂量组,IFN-γ含量明显高于中低剂量组,差异有显著统计学意义（P<0.01）;（5）中、低剂量组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。4.转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达水平:（1）与空白组相比,模型组大鼠肺组织T-bet mRNA表达明显降低、GATA-3 mRNA表达明显升高,差异有显著统计学意义（P<0.01）;（2）与模型组相比,各给药组T-bet mRNA表达升高,GATA-3mRNA表达降低,有统计学差异（P<0.05）;（3）与地塞米松组相比,三子养亲汤高剂量组无统计学意义（P>0.05）;（4）三子养亲汤各剂量组比较,高剂量组能显著上调T-bet mRNA表达,下调GATA-3 mRNA表达,与中低剂量组相比差异有显著统计学意义（P<0.01）;（5）三子养亲汤中、低剂量组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。实验结论:1、OVA致敏及雾化可成功复制大鼠哮喘模型,模型大鼠血清及BALF中IL-4含量明显增高,IFN-γ含量明显降低,Th1/Th2失衡;2、经三子养亲汤干预后,哮喘模型大鼠血清及BALF中IL-4含量明显下降,IFN-γ含量上升,并呈现明显的剂量依赖,作用效果与阳性药地塞米松具有一致性;3、PCR结果提示,三子养亲汤可以通过下调Th2特异性表达因子GATA-3 mRNA水平,上抬Th1特异性表达因子T-bet mRNA水平,实现在转录水平层面调控Th1/Th2,该作用可能是药物发挥治疗哮喘作用的重要分子机制。