Bcl-2和Caspase-3在中华鳖输卵管的定位分布及其与精子储存的关系

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中华鳖隶属于爬行纲龟鳖目,是我国爬行动物的代表种之一,进化地位比较特殊,同时又是我国主要的水生养殖动物之一,营养丰富,具有重要的经济价值和药用价值,其养殖越来越受到人们的关注。雌性中华鳖排卵及与雄性进行交配的时间存在相互错位,这使得精子储存在雌性体内成为一种生殖需要。本文以中华鳖为模式动物,明确精子储存的详细时间与精子在输卵管上详细的储存位置以及不同时段输卵管上Bcl-2蛋白与Caspase-3蛋白的分布,探究精子储存与Bcl-2蛋白及Caspase-3蛋白的关系,以期为中华鳖精子储存的分子机制研究提供一定的理论依据。实验Ⅰ:雌性中华鳖输卵管的精子储存现象通过苏木精-伊红染色法(HE染色)对一年内的雌性中华鳖输卵管进行染色,以明确雌性中华鳖输卵管存在精子储存现象的具体分段及精子储存出现的时间;通过透射电子显微镜观察输卵管上皮的微观结构。结果表明,雌性中华鳖精子储存主要出现在阴道部、子宫部和峡部,时间为11月到来年的4月;精子在储存期间会与上皮发生接触,甚至将头部伸入腺体导管在上皮的开口处。这说明腺体的分泌活动和上皮与精子储存现象是相关的,提示上皮与腺体能够分泌某些分泌物,与上皮纤毛一起形成有利于精子储存的微环境,从而维持和促进精子储存现象。实验Ⅱ:雌性中华鳖输卵管上Bcl-2蛋白的定位及其与精储的关系应用免疫组织化学(IHC)的方法观察Bcl-2蛋白在各时间段输卵管上的分布特点。结果表明:Bcl-2蛋白存在于雌性中华鳖输卵管上,且在各个时期的阴道部、子宫部和峡部均有分布,但不同时期的分布部位略有不同。在7月-10月,Bcl-2蛋白主要分布在腺细胞,而在14月,Bcl-2蛋白除了分布在腺体细胞外,还分布在上皮纤毛细胞顶端以及腺体导管位于上皮的开口处。Bcl-2蛋白的分布时间与位置和精子储存发生的时间与位置具有联系性,这提示Bcl-2蛋白与精子储存现象相关。实验Ⅲ:雌性中华鳖输卵管上Caspase-3蛋白的定位及其与精储的关系应用免疫组织化学(IHC)的方法,观察半耽氨酸天冬氨酸蛋白水解-3蛋白(Caspase-3蛋白)在各时期雌性中华鳖输卵管阴道部、子宫部和峡部的分布特点.结果表明:Caspase-3蛋白在各个时期的阴道部、子宫部和峡部均有分布,但不同时期的分布部位略有不同。Caspase-3蛋白在1月-4月主要分布在腺体细胞胞质和黏膜上皮与固有膜之间的毛细血管周围,7月-10月则主要分布在腺细胞细胞膜、黏膜上皮与固有膜之间的毛细血管周围和上皮的纤毛细胞顶端.Caspase-3蛋白的分布时间与位置和精子储存发生的时间与位置具有联系性,提示Caspase-3蛋白与精子储存现象相关。
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