【摘 要】
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以甜玉米芯为原料进行多糖的提取,用DEAE-52纤维素柱层析以及葡聚糖凝胶G-100进行分离纯化,对纯化后多糖进行纯度鉴定、分子量测定以及单糖组成。并研究甜玉米芯多糖SCP50对
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以甜玉米芯为原料进行多糖的提取,用DEAE-52纤维素柱层析以及葡聚糖凝胶G-100进行分离纯化,对纯化后多糖进行纯度鉴定、分子量测定以及单糖组成。并研究甜玉米芯多糖SCP50对α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶的抑制动力学研究,以及测定甜玉米芯多糖SCP50对正常大鼠离体小肠内蔗糖酶以及α-淀粉酶的抑制作用研究。并建立糖尿病大鼠模型,建模成功后分别灌胃,测定大鼠体重、血糖值,以及观察胰岛组织,同时测定各组糖尿病大鼠十二指肠、空肠以及回肠中二糖酶的活性,得到以下结论:(1)采用热水浸提法提取甜玉米芯多糖,Sevage法脱蛋白,大孔树脂脱色。并根据多糖中不同的组分带电荷量不同以及分子量大小的不同,经过DEAE-52纤维素柱层析分离,蒸馏水和NaCl溶液梯度洗脱后,得到一个组分,回收率为35.01%。该组分经葡聚糖凝胶G-100柱层析,得到一个均一组分,命名为SCP50,回收率为55.31%。(2)紫外吸收光谱检测,说明SCP50中不含或含有少量核酸、蛋白质等杂质成分。红外吸收光谱分析,证明SCP50存在β-糖苷键。通过气相色谱图及高效液相凝胶色谱分析,得到SCP50分子量为9280.325Da,是由甘露糖和葡萄糖组成的杂多糖。(3)酶抑制动力学研究表明,SCP50对α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶表现出较强的抑制活性,IC50分别为4.866mg/mL和5.129mg/mL,且酶的抑制率随着多糖样品浓度的增加而升高。SCP50对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制类型为可逆性抑制,竞争方式为高活性竞争,Km值分别为1.297×10-3和0.669,Vmαx分别为0.0759和0.1437mol/L·min-1。(4)体内实验表明,SCP50对于正常大鼠离体小肠内的蔗糖酶、α-淀粉酶均有一定的抑制作用,IC50分别为5.413和27.263mg/mL。动物实验结果显示,SCP50(50、100、200mg/kg.d-1)可以改善STZ诱导的糖尿病大鼠体重的减轻和血糖水平的增加,有效地缓解糖尿病症状,且呈有剂量性依赖;采用HE染色,根据STZ诱导大鼠胰腺组织病理切片分析推测SCP50对大鼠β细胞有明显的修复。SCP50对大鼠体内糖酶抑制结果表明,SCP50对糖尿病大鼠十二指肠、空肠以及回肠中的麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶均有抑制作用。
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