丝素蛋白材料的生物降解性研究

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蚕丝蛋白因其优异的综合力学性能、良好的生物相容性、细胞黏附性以及可生物降解性成为生物医药等高新技术领域中极具应用潜力的一种天然高分子。丝素蛋白作为手术缝合线、组织工程支架材料和药物缓释载体等的报道日渐丰富。但是人们对丝素蛋白材料的降解行为尚缺乏细致深入的了解。 本论文采用淀粉液化芽孢杆菌蛋白酶和灰色链酶菌蛋白酶对生物医药领域中经常使用的三种形态的丝素蛋白材料——致密膜、多孔支架、丝纤维进行降解实验,探索这些材料的生物降解性以及结构这一因素对降解行为的影响。借助扫描电子显微镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)、近红外光谱(NIR)凝胶过滤色谱(GFC)、电子拉力机(Instron)、氨基酸分析等手段对酶促降解后材料的结构、微观形貌、力学性能等进行分析,并对降解液组成进行了初步探索。 结果表明,无论是何种形态的丝素蛋白材料在适当的蛋白酶作用下都能够被最终降解而材料的微观结构是影响其降解速率快慢的一个重要因素。在丝纤维、致密膜和多孔膜材料的酶促降解过程中,总是材料中规整性相对较差的区域优先被进攻,无规部分溶失最快,Silk Ⅰ结构(分子链以螺旋构象为主)次之,SilkⅡ结构(分子链以β-折叠构象为主)最不易被降解。尤其是SilkⅡ结构的增加,可以明显减缓降解速率,提高材料的抗酶降解性能。因此,调节材料中SilkⅡ结构的含量可以成为调控丝素蛋白材料降解速率的有效途径。 对部分降解产物的分析表明,因非规整区域的优先溶失,降解残余材料中的规整度有了进一步的提高,而材料的整体形貌随降解程度的深入受到越来越严重的破坏。降解液中蛋白质分子量很小,均低于3 k Da,产物成分因丝素蛋白材料中Silk Ⅰ结构和SilkⅡ结构的含量不同而略有差异。
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