【摘 要】
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研究背景及目的 黑色素瘤抗原基因家族(MAGE gene family)主要包括四个亚家族：MAGE-A，MAGE-B，MAGE-C和MAGE-D，它们分别位于X染色体的Xq28，Xp21.3，Xq26和Xp11。其中MAGE-A又包含1
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研究背景及目的 黑色素瘤抗原基因家族(MAGE gene family)主要包括四个亚家族：MAGE-A，MAGE-B，MAGE-C和MAGE-D，它们分别位于X染色体的Xq28，Xp21.3，Xq26和Xp11。其中MAGE-A又包含12个基因，从MAGE-1至MAGE-12。MAGE-1基因位于X染色体长臂末端，基因片段长4.5kb，含有3个外显子，其转录的mRNA全长1722bp。MAGE-1编码的肿瘤相关抗原MZ2-E为单链的多肽，包含309个氨基酸残基。近年来，国内外大量文献报道，MAGE-1基因在肝癌、食管癌、胃癌、舌癌、白血病、头颈癌、肺癌、骨肉瘤、膀胱癌、卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤等常见肿瘤中都有较高的表达率，而在正常组织、炎症组织及良性肿瘤组织中无该类基因的表达。迄今为止，已发现8个由MAGE-1基因编码的HLA-I类分子限制的CTL表位。因此，利用MAGE-1抗原作为肿瘤疫苗用于肿瘤病人的特异性免疫治疗具有广阔的前景。 本研究利用分子生物学技术，克隆并在体外高效表达MAGE-1基因。构建MAGE-1基因疫苗，并在细胞水平和动物个体水平进行抗肿瘤生物活性方面的研究。为肿瘤的辅助ELISA检测、肿瘤的生物学治疗和瘤苗的研制奠定基础。 材料和方法 从人肝细胞性肝癌(HCC)组织中提取总RNA，通过RT-PCR扩增出MAGE-1基因，酶切鉴定后。将其插入pGEM-T Easy载体，对其进行序列测定并与GenBank已知序列进行同源性分析。再将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达
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