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目的: 通过建立体内、体外三阴性乳腺癌多药耐药(MDR)模型，观察益气小复方逆转MDR的作用。从ABC转运蛋白的胞吐、PI3K/Akt信号转导通路异常介导的MDR等多个途径探讨益气小复方发挥逆转作用的机制，为益气扶正法逆转三阴性乳腺癌MDR的临床实践提供实验依据。 方法: 1.第一部分研究以三阴性乳腺癌亲本细胞株MDA-MB-231为研究对象，通过MTT、FCM、Real-time PCR及Western blot法检测益气小复方和MK2206两药联合对细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt通路相关的Akt蛋白表达水平的变化。 2.第二部分研究通过顺铂(DDP)诱导建立耐药细胞株MDA-MB-231/DDP，并对其耐药特性进行鉴定。选用无毒剂量的益气小复方及MK2206单独或联合干预MDA-MB-231/DDP细胞，通过MTT法检测逆转耐药指数。HPLC法检测耐药细胞内DDP浓度的改变，并通过Real-time PCR、免疫组化、Western blot检测耐药相关基因、蛋白表达，以及PI3K/Akt关键分子的表达。 3.第三部分研究通过DPP低剂量诱导及体内外交叉致瘤结合建立三阴性乳腺癌耐药小鼠模型，并对其耐药特性进行鉴定。将三阴性乳腺癌耐药小鼠模型随机分为模型（生理盐水）组、DDP组、益气小复方组、MK2206组，以及益气小复方+MK2206组。同时建立小鼠三阴性乳腺癌非耐药小鼠模型，随机分为模型（生理盐水）组、DDP组。分别给予相应药物干预4周，运用小动物活体成像技术于不同时间点观察各组肿瘤生长情况。心、肝、脾、肺、肾HE检测观察各组药物副作用。用Real-time PCR法、免疫组化及Western blot法检测各组耐药基因蛋白表达变化及p-Akt和总T-AM蛋白表达水平的表达变化。 结果: 1.第一部分研究结果显示，MK2206联合益气小复方较两药单独处理对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用更为明显。两药联合促进细胞凋亡，并降低p-Akt蛋白表达（单用主效应p＜0.01，联用协同效应p＜0.01）。 2.第二部分研究结果显示，建立的MDA-MB-231/DDP细胞株达中度耐药，具有多药耐药性。浓度为3.125 nM的MK2206及浓度为1.5625 g/L益气小复方能逆转MDA-MB-231/DDP细胞耐药性（单用主效应p＜0.01，联合交互效应 p＜0.01)。两药联用能有效提高耐药细胞内DDP的浓度，降低MDR1、BCRP、MMP7、GST-π耐药基因及p-GP、BCRP、MMP7耐药蛋白表达，并抑制p-Akt蛋白的表达（单用主效应p＜0.01，联合交互效应p＜0.01）。 3.第三部分研究结果显示，建立的三阴性乳腺癌耐药小鼠模型达中等耐药程度。非耐药小鼠与耐药小鼠肿瘤组织生长速度未见明显区别(p＞0.05)。分别给予这两种模型小鼠相同剂量的DDP治疗后，耐药小鼠对DDP的敏感性明显低于非耐药小鼠(p＜0.01)。给予MK2206和（或）益气小复方后各组小鼠肿瘤均较模型组缩小（单用主效应p＜0.01;联用交互作用p＜0.01）。益气小复方与MK2206可降低MDR1、BCRP、MMP7、GST-π耐药基因及p-GP、BCRP、MMP7蛋白表达水平（单用主效应p＜0.01，联合交互效应p＜0.05），并抑制p-Akt蛋白表达（单用主效应p＜0.01，联合交互效应p＞0.05）。 结论: 益气小复方和MK2206可抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖，诱导凋亡，联合用药效果更显著，其机制可能与抑制Akt磷酸化从而阻断PI3K/Akt信号转导途径有关。首次建立的三阴性乳腺癌MDR的细胞及动物模型具有多药耐药的特性。益气小复方及MK2206均能逆转耐药细胞的耐药性，提高耐药小鼠对DDP的敏感性，两药联用具有协同增效作用。而该逆转耐药作用的发生可能是通过ABC转运蛋白的胞吐和PI3K/Akt信号转导通路异常介导的MDR等多个途径发挥的。