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第一部分：研究PRF对AML和CML细胞株的生长抑制及诱导凋亡的情况目的：研究和比较PRF对AML和CML细胞株的生长抑制作用及诱导凋亡的情况。从而为进一步研究PRF的抗白血病作用机制打下基础。方法：MTT法检测PRF对白血病细胞株的生长抑制作用,AV/PI流式细胞检测术检测PRF诱导白血病细胞株的凋亡情况,Hoechst染色法观察PRF诱导白血病细胞凋亡的形态学改变,Western-blot法检测PRF作用后caspase-3、caspase-9和PARP蛋白的表达变化,Western-blot法检测白血病细胞株相关基因蛋白的表达情况。结果：(1)0～20gmol/L的PRF作用CML细胞株K562、K562/G以及AML细胞株Kasumi-1、HL-6024小时后,IC50分别是121.74、311.3、11.08、11.14μmol/L,作用48小时后IC50分别是56.28、141.75、4.24、3.62μmol/L。表明AML细胞株对PRF敏感,而CML细胞株则不敏感。(2)10μmol/L的PRF分别作用K562、K562/G、Kasumi-1和HL-60细胞株24小时后,AV/PI流式术检测显示凋亡率分别为8.23%、7.37%、26.72%、25.80%,表明PRF可显著诱导AML细胞株凋亡,而对CML细胞株不敏感。(3)10μmol/L的PRF作用24H后,AML细胞株Kasumi-1和HL-60的细胞核内可见明显的凋亡小体,而CML细胞株K562和K562/G中则未见凋亡小体,从形态学上证明PRF可以诱导AML细胞发生凋亡,但基本不诱导CML细胞凋亡。(4)PRF诱导AML细胞凋亡时,caspase-3、caspase-9、PARP蛋白激活,而CML细胞株的caspase-3、caspase-9、PARP则未见激活。(5)AML细胞株Kasumi-1和HL-60在经PRF作用24小时后,AKT和P-AKT的表达有明显的下调,JNK和P-JNK可见明显的上调,而对PRF不敏感的CML细胞株K562和K562/G中这些蛋白的表达水平无明显变化。第二部分：研究CML细胞株对PRF耐药的机制以及自噬在其中的作用目的：进一步研究CML细胞株K562和K562/G对PRF耐药的潜在机制,以及自噬在其中的作用。从而为CML的治疗提供更为有效的药物打下基础。方法：通过吖啶橙染色、透射电镜和LC3-GFP-K562荧光改变检测PRF诱导CML细胞K562产生自噬,Western-blot法检测PRF作用K562细胞后LC3及自噬相关蛋白的表达变化,MTT法检测PRF联合CQ对CML细胞株的生长抑制作用。结果：(1)PRF可以诱导CML细胞株发生自噬,且呈浓度依赖性。(2)PRF诱导CML细胞发生的自噬伴随Atg-5的上调,却未见Beclin-1和Atg-7的上调,为非Beclin-1依赖性的。(3)PRF诱导CML细胞产生的自噬被抑制后,可以增强PRF对CML细胞的杀伤作用,表明该种自噬起保护性作用。结论：PRF可以下调Akt,显著抑制AML细胞株Kasumi-1和HL-60生长并诱导凋亡,但对CML细胞株K562和K562/G则无此作用。PRF对CML耐药可能与其诱导CML细胞产生保护性自噬有关,该种自噬为非Beclin-1依赖性的,抑制自噬可以增强PRF对CML细胞的杀伤作用,诱导凋亡。