乳源免疫调节肽抗人卵巢癌及其机制的研究

• 作 者: 顾芳
• 机 构: 安徽医科大学
• 出 处: 安徽医科大学
• 发表日期: 2007年期
• 关键词: 免疫调节肽 卵巢癌 细胞凋亡 流式细胞仪 Bcl-2 caspase-3

目的：通过荷人卵巢癌(SKOV3)裸鼠模型，研究乳源免疫调节肽(immunodulatingpeptide)的抑癌作用，并从细胞凋亡(Apoptosis)及相关基因bcl-2、caspase-3的表达情况等探讨其可能的机制。
方法：利用人卵巢癌细胞株(人卵巢浆液性乳头状囊腺癌，SKOV3)建立荷人裸鼠模型。24只BALB/cAnN-nu/nu(BALB/c Nude)近交系(Inbred strain)健康雌性裸鼠被随机分为对照组(NS)、低剂量组(PGPIPN1)、高剂量组(PGPIPN2)和5-氟尿嘧啶组(5-fu)，分别用生理盐水，低剂量免疫调节肽(0.25mg/ml)，高剂量免疫调节肽(0.50mg/ml)，5-氟尿嘧啶(30mg/kg/d)通过腹腔注射，治疗荷人卵巢癌裸鼠，五周后处死裸鼠，测量荷瘤裸鼠的体重、瘤重、脾重，计算抑瘤率、脾指数，观察其疗效，并用流氏细胞术、HE染色、免疫组化、RT-PCR、DNA分析技术、放射免疫技术(RIA)，观察乳源免疫调节肽对卵巢癌细胞抑制作用，并研究其诱导细胞凋亡等作用机制。
结果：1．荷人卵巢癌裸鼠经免疫调节肽治疗后出现肿瘤体积缩小，高剂量免疫调节肽抗瘤效果优于低剂量组，同时还能改善荷瘤裸鼠的体质，提高荷瘤裸鼠的生存质量，增强荷瘤鼠免疫功能。2．运用放射免疫方法测定：对照组裸鼠血清中IGF-1明显高于免疫调节肽高低剂量组。3．组织病理学发现：免疫调节肽低剂量组可见小片状瘤细胞坏死和发生凋亡，高剂量组可见瘤细胞大片坏死和发生凋亡。4．低剂量组和高剂量组瘤组织中提取的DNA进行琼脂糖电泳均出现特征性DNA梯状电泳条带。5．流氏细胞仪图显示低剂量组、高剂量组呈现明显的亚二倍凋亡峰，在对照组凋亡率为3％，在低剂量组为16％，而在高剂量组为49％。6．免疫组化和RT-PCR测定显示应用免疫调节肽治疗后，促凋亡蛋白caspase-3在高剂量组中表达最高，低剂量组次之，在对照组中最低，bcl-2则在对照组表达最高，在免疫调节肽低剂量组、高剂量组表达依次降低，RT-PCR半定量检测结果与免疫组化相一致，表明免疫调节肽诱导的人卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡过程可能与凋亡相关基因bel-2下调、caspase-3上调有关。
结论：免疫调节肽有明显的抑瘤效应，可诱导人卵巢癌细胞发生凋亡。血清中IGF-1含量也发生了变化。caspase-3,bcl-2凋亡相关基因可能参与了免疫调节肽诱导的人卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡过程，免疫调节肽通过下调bcl-2基因表达，上调caspase-3基因表达等机制诱导细胞凋亡。