利用农杆菌真空渗透在烟草中瞬时表达人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)

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利用植物生物反应器生产药用蛋白是近年兴起的一种生产蛋白的新技术,它与其他生物反应器如动物生物反应器、蛋白的原核表达系统等相比有许多优势:a,安全,可有效的避免病毒、内毒素对人体的伤害;b,蛋白能在植物体内正确折叠,本身的糖基化与动物本身也十分的相似;c,成本底;d,操作简单,设备简易;e,可以大规模生产。利用农杆菌真空渗透的瞬时表达体系表达药用蛋白与植物的稳定转化相比,表达周期短、表达量高、无环境安全性问题,有很好的发展前景。 人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF,FGF-1)是成纤维细胞生长因子超家族成员,来自于三个胚层的多种细胞都可以表达aFGF。aFGF在治疗帕金森综合症、急性脊柱扭曲性损伤、断指中神经功能重建、脑缺血、肾缺血、心肌梗塞、闭塞性脉管炎、视网膜缺血、胃溃疡及难愈合性伤口等多种临床应用方面具有巨大潜力。 通过农杆菌真空渗透法在烟草中瞬时表达人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)基因,并对影响表达量的几个因素进行了研究。结果表明在真空渗透后4天,外源基因获得高水平的表达,烟草Nicotianabenthamiana(N.b)的表达量明显低于烟草N.H(转基因沉默抑制子Hc-pro的N.b植株)。ELISA结果表明haFGF基因在表达载体pM390-haFGF/KDEL中得到最高水平的表达,Valentine等培养方法的表达量高于Kapila等培养方法的表达量,叶片有划痕的烟草材料的表达量高于叶片完整的烟草材料的表达量。
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