【摘 要】
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背景:组织工程的三要素为支架、种子细胞、生长因子。聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)凭借其优良的生物相容性和机械性能,是当前热门的可降解支架材料之一。但PCL的疏水性限
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背景:组织工程的三要素为支架、种子细胞、生长因子。聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)凭借其优良的生物相容性和机械性能,是当前热门的可降解支架材料之一。但PCL的疏水性限制了其在组织工程领域的应用。本文通过制作乙二胺(Ethylenediamine,ED)修饰包载血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的PCL微囊支架(VEGF/ED-PCL),对其进行表征,测试其对细胞粘附、增殖,以及小鼠皮下血管化的影响。方法:本文首先使用W/O/W法制备PCL微囊,然后通过熔融蒸发法成功制备VEGF/ED-PCL三维支架,进而通过乙二胺修饰其表面以改善支架亲水性。对其进行表征,观察材料表面形貌、测试材料接触角、微囊粒径分布和体外释放性能。将材料接种人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)后,通过场发射扫描电镜(Field emission scanning electron microscope,FESEM)观察细胞生长形态,结合CCK-8(Cell counting kit-8)检测细胞增殖情况。同时将VEGF/ED-PCL组、VEGF/PCL组、PCL组支架植入小鼠皮下,二周后取得支架周围皮下组织,行免疫组化染色,光学显微镜下分别对比两组微血管形成数目。结果:成功制备VEGF/ED-PCL微囊支架,扫描电镜(SEM)下观察显示材料具有多孔结构。VEGF/ED-PCL微囊支架体外7天释放率为30%,且曲线无明显突释。检测细胞增殖情况的CCK-8结果显示,HUVEC在VEGF/ED-PCL微囊支架组上高于VEGF/PCL微囊支架组,也高于PCL微囊支架组。免疫组化染色和光学显微镜下均观察到,植入VEGF/ED-PCL、VEGF/PCL微囊支架的小鼠皮下微血管生成高于ED-PCL和PCL支架组,差异均有统计学意义。(p<0.05),且VEGF/ED-PCL和VEGF/PCL组间阳性血管数无显著性差异。(p>0.05)。结论:本研究成功制备了 VEGF/ED-PCL微囊支架,改善PCL的亲水性,具有良好体外释放性能,适宜细胞粘附增殖,生物相容性良好,在小鼠皮下可以促进血管的新生,且并未对细胞和组织造成毒性。在未来组织工程中具有应用前景。
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