培养胚胎、小儿皮肤成纤维细胞的比较及TGF-β1对小儿成纤维细胞的干预研究

来源 :泸州医学院 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianjiaomylove
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究培养人胚胎、小儿皮肤成纤维细胞及TGF-β1干预后小儿皮肤成纤维细胞的盘状结构域受体1(discoidin domain receptor; DDR-1)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases; MMP-13)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen; PCNA)、I型胶原(collagen I; Col-I)及III型胶原(collagen III; Col-III)的表达及相互关系,从而探讨I、III型胶原的可能降解途径并观察培养胚胎与小儿皮肤成纤维细胞的形态特征。方法:①原代培养小儿包皮成纤维细胞(human postnatal dermal fibroblast; hPDF)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human fetal dermal fibroblast; hFDF)并传代;②应用HE染色法观察hFDF与hPDF的形态结构特点;③应用免疫组织化学S-P法检测hFDF与hPDF的DDR-1、 MMP-13、增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen; PCNA)、I型胶原(collagen I; Col-I)及Ⅲ型胶原(collagen III; Col-III)的表达;④利用外源性转化生长因子β1(TGF-β1)(5ng/ml)干预hPDF,并设立TGF-β1未干预的对照组,分别于TGF-β1孵育8小时、24小时、48小时、96小时收获细胞;⑤应用免疫组织化学S-P法观察不同时间点TGF-β1干预组与对照组hPDF的PCNA和DDR-1、 MMP-13、I型胶原及Ⅲ型胶原的表达;⑥应用IX-71(OLYMPUS)显微成像系统在低倍(×100)视野下观察分析及照相,用Image-pro6.0图像分析系统测定各项指标的平均光密度值;⑦所得数据以均数±标准差(x±s)表示。采用spss19.0统计软件进行统计学分析,应用两独立样本t检验、秩和检验、重复测量方差分析、单因素方差分析、LSD检验及多重线性回归分析法,P<0.05为具有统计学意义。结果:①hFDF与hPDF形态都可表现为长梭形,核大,核仁明显。(2) hFDF组DDR-1、MMP-13、I型胶原、III型胶原及PCNA的平均光密度值皆高于hPDF组(P<0.05),hFDF组与hPDF组的III型胶原/I胶原无统计学意义(P>0.05)。③hPDF组中DDR-1对I型胶原、III型胶原、 MMP-13,I型胶原对DDR-1、III型胶原、MMP-13,[II型胶原对Ⅰ型胶原、DDR-1、 MMP-13的线性回归方程具有显著性,而hFDF组中的各线性回归方程不具备显著性。④TGF-β1干预与对照组的两组细胞在不同时间点上Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、DDR-1、 MMP-13、 PCNA的平均光密度值不同(P<0.05),其中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-13表达的基线上调(P<0.05)。⑤TGF-β1干预后拟合出DDR-1对Ⅰ型胶原、MMP-13, I型胶原对DDR-1、 MMP-13及Ⅲ型胶原对Ⅰ型胶原、DDR-1、 MMP-13的线性回归方程皆具有统计学意义。结论:①hFDF比hPDF功能活跃。②在hPDF中DDR-1与Ⅲ型胶原之间存在相互作用的正反馈环路。③MMP-13可以促进成纤维细胞合成Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原。④胶原—成纤维细胞信号系统中,hPDF β夅解胶原的机制可能与胶原产生→激活胶原受体DDR-l→激活基质金属蛋白酶MMP-13途径有密切关系,但hFDF的胶原降解机制可能与此途径无关。⑤在hPDF中,TGF-β1可以促进I型和Ⅲ型胶原、MMP-13的合成。⑥TGF-β1干预后,hPDF的增殖能力降低。⑦TGF-β1干预后在hPDF中,I型胶原与DDR-1之间的相互作用存在正反馈环路。⑧TGF-β1干预后,胶原产生→激活胶原受体DDR-1→激活基质金属蛋白酶MMP-13途径在小儿胶原降解中发挥了作用,但TGF-β干预后小儿胶原的降解可能并非由其一条途径完成,还存在其它途径及细胞因子的协同作用。
其他文献
目的: 观察补气中药对S180荷瘤小鼠重要生命脏器线粒体形态的影响并探讨其作用机制。方法:通过建立 S180 荷瘤动物模型,按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、环磷酰胺(
目的:扩增出斯氏狸殖吸虫线粒体Cytb (cytochrome B)基因片段并测序,研究斯氏狸殖吸虫线粒体cytb基因在囊蚴期、30天幼虫期、60天童虫期、成虫期和虫卵期5个虫期的表达情况,分
中长跑项目的练习,持续时间长,运动量大,过程单一枯燥,缺少趣味性和娱乐性。为了提高学生练习中长跑的关趣和积枀性,幾大体育教师刻苦钻研教材教法,充分开収和利用教材、场地和器材
2012年度的星云奖和雨果奖提名名单先后公布。让中国科幻迷惊喜的是,这两份名单上有两个华裔的名字——Ken Liu和E.Lily Yu。Ken Liu是我们已经比较熟悉 Nominations for th
水稻品种区域试验,是国家业务部门对新选育的或从国内外新引进的品种(组合),有计划地安排在有代表性的不同地区,连续2~3年进行试验,客观鉴定其丰产性、稳产性、适应性、抗逆
目的建立酒精诱导的PC12细胞凋亡模型,观察酒精对PC12细胞神经鞘磷脂循环相关酶活性及其mRNA的表达量的影响,分析神经鞘磷脂循环在神经细胞凋亡中的作用,为进一步研究神经细胞凋
教学反思是挃教师将自己的课堂教学实践作为认识对象迚行全面深入的思考和总结,迚而优化教学状态的一种教学行为,教学反思是提高教学效益的重要途径,也是教师积累教学经验的有效
“组合兲系”与“聚合兲系”是语言学中十分重要的概念。它们可以被用来解决各种各样的问题。本文就是用这组概念来分析歌德的名诗《迷娘乊歌》总的意象。这是歌德作于1783年
新教材以生动熟悉的生活情境、文本对话的形式展现给孩子们,给孩子们一种亲切感。她为所有蒙丆眼睛的?笨小孩?摘万眼罩,使他们看到数学就在他们的身边,生活中处处有数学,只要留心
本届上海展会最大的亮点无疑是新辟-1F开设的精品馆,这个由一众国内优秀自主品牌为主角的新展区,无论从参展展位装修档次和格调,还是从参观者数量的火爆程度,与其他展馆相比,