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目的:根据复发性流产发展过程,采用基因组学的研究方法,检测复发性流产大鼠模型子宫蜕膜中AQP1及AQP2基因表达的情况,探讨母胎界面液体转运的调节通路,从液体转运及“肾主水”的角度阐明寿胎丸防治复发性流产可能的作用机制及物质基础,为中药治疗复发性流产提供理论依据。方法:经检疫1周的健康性成熟且未经交配生育的,60只8周龄、体质量(210.32±10.19)g的SPF级SD雌性大鼠;30只10周龄、体质量(252.83±5.67)g的SPF级SD雄性大鼠。适应性喂养1周后,按雌鼠:雄鼠2:1的比例进行合笼交配,雌性大鼠于次日早晨观察到其阴道口有阴道栓脱落(即阴道口乳白色固体),且其阴道涂片可见大量精子作为妊娠第1天。将60只孕鼠按照随机列表法分为6个组,分别为寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组,寿胎丸低剂量组、西药对照组(地屈孕酮)、模型组、正常对照组,每组10只,6组按顺序标记为A-F组。妊娠的第1~9天的每日上午,寿胎丸组孕鼠予以寿胎丸中药药液灌胃2mL/d,且每组剂量分别为高剂量组(2.0g/Kg)、中剂量组(1.0g/Kg)、低剂量组(0.5g/Kg);地屈孕酮组孕鼠予地屈孕酮水溶液灌胃(3.02mg/Kg),2mL/d;模型组和正常妊娠组孕鼠每日上午予生理盐水灌胃2ml/d。妊娠的第1~9天的每日下午,正常妊娠组孕鼠予以生理盐水灌胃2ml/d,其余各组孕鼠均予以羟基脲片水溶液灌胃(450mg/Kg),2ml/d,妊娠的第10天早上A-E组孕鼠予米非司酮片水溶液灌胃(4.0mg/kg),2ml/d。且灌胃期间分别于第1、4、9日测量孕鼠的饮食和饮水量、体质量。所有孕鼠于第11日断颈处死,开腹分离妊娠子宫,计算各组孕鼠流产率,并分离着床部位的子宫蜕膜组织,用预冷的PBS缓冲液冲洗干净后,用滤纸吸净液体,装于冻存管内,迅速置于液氮灌中保存备用,后冻存在-80℃冰箱中等待检测,最后用RT-PCR法进行检测。结果:1.胚胎发育情况所有孕鼠于第11日(末次给药24h后)断颈处死,开腹解剖分离孕鼠妊娠子宫。正常组:可观察到淡红色的子宫,胚胎组织大小一致,无竹节样改变,且宫腔内无明显的瘀血及瘀血点,着床点无明显缩小,胚胎组织均正常未被机化。模型组:可观察到暗红色或暗黑色的子宫,胚胎组织大小不一,呈现出竹节样的改变,宫腔内可发现黑色瘀血,或为着床处可见瘀血点,或着床点明显缩小,或胚胎组织已被机化。地屈孕酮组:可观察到淡红色或暗红色的子宫,胚胎组织大小基本一致,偶为不均一,无竹节样改变,宫腔内偶有瘀血点,但着床点无明显缩小,胚胎组织均正常未被机化。寿胎丸高剂量组、中剂量组、低剂量组:三组孕鼠可观察到淡红色或暗红色的子宫,大部分胚胎组织大小一致,小部分为不均一,无竹节样改变,宫腔内偶有瘀血点,但着床点无明显缩小,胚胎组织均正常未被机化。2.各组孕鼠胚胎流产率的比较与正常妊娠组的孕鼠相比,寿胎丸低剂量组、中剂量组、高剂量组,地屈孕酮组以及模型组的孕鼠的流产率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);使用不同药物进行干预后,与模型组孕鼠进行比较,寿胎丸低剂量组、中剂量组、高剂量组,以及地屈孕酮组孕鼠的流产率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与地屈孕酮组孕鼠进行比较,寿胎丸高剂量组孕鼠的流产率,无明显差异(P>0.05)。3.各组孕鼠蜕膜组织中AQP1基因表达差异与正常妊娠组对比,模型组P<0.01,差异具有显著统计学意义,提示模型组孕鼠子宫蜕膜组织中AQP1基因表达水平明显降低;进行药物干预后,与模型组比较,寿胎丸高剂量组、中剂量组、低剂量组及地屈孕酮组,P值均<0.01,差异具有显著统计学意义,提示药物干预后的,孕鼠蜕膜组织中AQP1基因表达水平显著升高;与寿胎丸高剂量组对比,寿胎丸中剂量组、低剂量组P值均<0.05,差异有统计学意义,提示高剂量组AQP1基因表达显著升高;与地屈孕酮组相比,中剂量组P>0.05,差异无统计学意义,提示寿胎丸中剂量与地屈孕酮的疗效相当。与地屈孕酮组相比,寿胎丸高剂量组P值<0.05,差异有统计学意义,提示寿胎丸高剂量组疗效优于地屈孕酮组。4.各组孕鼠蜕膜组织中AQP2基因表达差异与正常妊娠组比较,模型组P<0.01,差异具有显著统计学意义,提示模型组孕鼠子宫蜕膜组织中AQP2基因表达水平明显降低;进行药物干预后,与模型组对比,寿胎丸高剂量组、中剂量组及地屈孕酮组,P值均<0.01,差异具有显著统计学意义,提示药物干预后的,孕鼠蜕膜组织中AQP2基因表达水平明显升高;与寿胎丸高剂量组对比,寿胎丸中剂量组、低剂量组、地屈孕酮组P值均<0.01,差异有显著统计学意义,提示高剂量组AQP2基因表达显著升高;与地屈孕酮组对比,寿胎丸中剂量组P<0.05,差异有统计学意义,提示寿胎丸中剂量干预时,比地屈孕酮组疗效较差;与地屈孕酮组相比,寿胎丸高剂量组P<0.01,差异有显著统计学意义,提示寿胎丸高剂量组疗效优于地屈孕酮组。结论:1.寿胎丸能够促进复发性流产大鼠模型子宫蜕膜组织的血液循环,防止胚胎着床点的缩小,有利于胚胎的着床发育,扭转子宫竹节样改变,降低复发性流产大鼠模型的流产率,保胎疗效显著。2.寿胎丸可能是通过上调复发性流产大鼠模型子宫蜕膜组织中AQP1、AQP2的基因表达,达到种子安胎的目的。3.复发性流产大鼠模型子宫蜕膜组织中AQP1、AQP2的基因表达上调水平随寿胎丸的剂量增大而增大,但寿胎丸的安胎效果与其剂量的关系仍需再进一步研究。