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目的:本研究拟观察肾虚型卵巢储备功能下降的患者,以祖国医学滋阴益肾观点为切入点,拟采用归肾丸观察治疗效果,并在动物实验中探讨归肾丸的可能作用原理,在此二者基础上总结临床疗效和可能的作用机理,为临床治疗肾虚型卵巢储备功能下降提供一种行之有效的方法。方法:1.选取在湖北省中医院和武汉同济医院妇产科门诊就诊的DOR患者,共收集51例,时间段从2014年3月至2015年11月,符合卵巢储备功能下降的西医诊断标准和中医辨证分型属肾虚型,口服归肾丸,在月经周期的第5天(闭经患者在任意一天)开始服药,一个月经周期内连续服药14日,即1个疗程,用药疗程以3个月经周期为准。51例患者的观察结果在治疗前后于月经量、性状、色泽、血清性激素、中医症状及其总积分的变化进行分析研究。2.为了探讨中药方剂归肾丸对DOR的改善机理,还进行了更深层次的动物实验,通过观察造模后卵巢功能减退小鼠一般情况、动情周期、卵巢指数、原始卵泡数目及基础性激素值,以及对自身免疫卵巢功能减退小鼠进行归肾丸灌胃后观察对卵巢功能的变化,探讨中药归肾丸发挥改善卵巢功能的作用机理。结果:(1)临床观察:(1)分析51例患者的数据,其中痊愈、显效、有效及无效的例数分别为6、14、24及7,总体有效率为86.3%,此外,调经总有效率达94.1%;(2)用药后患者的中医症状积分显著下降,卵巢储备功能下降的症状(面部潮热、耳鸣头晕、盗汗、多梦失眠、性欲减退、腰骶酸痛等)均得到改善;(3)通过服用归肾丸,病人的激素水平都有了一定变化,其中E2值比治疗前显著升高,FSH值和LH值比治疗前有显著变化,FSH/LH比值比治疗前明显下降;(4)服药后,检查患者的三大常规、肝肾功能、心电图,结果与服药前无明显变化。在服药的过程中,患者也无腹痛腹泻等不适出现。(2)实验研究:(1)经药物治疗后,西药组、中药低、中、高剂量组小鼠日常情况较前均有所改善,饮食较前增加,并逐渐恢复至正常进食量,小鼠毛发优于自身免疫造模后;与模型组相比,西药组、中药低、中、高剂量组小鼠的体重都比模型组增加,结果显示差异有统计学意义(P<0.05);西药组小鼠体重与中药低、中、高三组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中药低、中、高三组小鼠体重进行比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)经自身免疫造模及药物治疗后,比较各组动情周期,对照组与西药组、中药中、高剂量组结果无统计学意义(P>0.05),对照组与模型组及中药低剂量组结果具有显著差异(P<0.05);模型组与西药组及中药低、中、高组比较,模型组动情周期明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);西药组与中药低、中、高组比较,中药低剂量组动情周期明显延长,差异显著(P<0.05),西药组与中药中、高组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)比较各组卵巢指数,对照组高于模型组,差异显著(P<0.05);模型组与西药组、中药低、中、高组比较,模型组结果低于西药组及三个中药组,差异显著(P<0.05);西药组与中药各剂量组相比,未见明显差异(P>0.05);中药低、中、高组进行组间比较,未见明显差异(P>0.05);将子宫指数进行比较,未见明显差异(P>0.05)。(4)比较各组原始卵泡数量,对照组与模型组、西药组及中药低、中、高组比较,对照组结果高于模型组及中药低剂量组,差异显著(P<0.05),对照组与其余治疗组结果未见明显差异(P>0.05);模型组与西药组及中药低、中、高组比较,模型组结果低于中药低剂量组,但差异无统计学意义(P>0.05),模型组结果与其余治疗组对比,模型组结果低于这些组别,差异显著(P<0.05);西药组结果与中药低、中、高相比,未见明显差异(P>0.05)。(5)比较各组性激素值,对照组与模型组、西药组及中药低、中、高组比较FSH值,模型组及中药低剂量组FSH均低于对照组,差异显著(P<0.05),余下组别差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较AMH值,西药组及中药低、中、高剂量组AMH均升高,差异显著(P<0.05),余下组别未见明显差异(P>0.05);模型组与西药组及中药低、中、高组比较E2值,模型组E2值降低,差异显著(P<0.05);西药组与中药低、中、高组进行比较,中药低剂量组低于西药组,差异显著(P<0.05),其余组别差异无统计学意义(P>0.05);中药低、中、高组比较E2、AMH值,低剂量组均低于其余两组,差异显著(P<0.05)。结论:经功效为滋阴益肾的方剂归肾丸治疗后,患者卵巢储备功能下降的症状(面部潮热、耳鸣头晕、盗汗、多梦失眠、性欲减退、腰骶酸痛等)均得到改善,且基础性激素值都有了变化,逐渐恢复至正常值。经动物实验结果显示归肾丸在改善性激素值方面疗效显著,可增加小鼠原始卵泡数,因此推测归肾丸作用机制可能是调节原始卵泡的启动、募集,保持原始卵泡休眠,以期达到使卵巢功能恢复的目的。综上所述:归肾丸对DOR的治疗有效且安全,临床有必要将其进行推广并应用。