【摘 要】
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核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种蛋白质。核酸酶广泛地存在于生命体中,对于生物生理活动有非常重要的作用。本研究以拟南芥Ca2+依赖性
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核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种蛋白质。核酸酶广泛地存在于生命体中,对于生物生理活动有非常重要的作用。本研究以拟南芥Ca2+依赖性核酸酶基因为研究对象,对其在拟南芥体内的表达调控和生理学功能进行初步分析。拟南芥中Ca2+依赖性核酸酶基因家族有两个成员:AtCa N1[TAIR:At3g56170]和AtCaN2[TAIR:At2g40410]。我们首先利用实时荧光定量PCR,分别对AtCaN2基因和AtCaN1基因在野生型拟南芥不同组织的表达量进行分析,并且研究了其在植株受到盐胁迫处理时的表达特性。通过结果来初步描述At Ca N2基因和AtCaN1基因的表达模式。发现At CaN2和AtCa N1基因都是在衰老的种荚中表达量最高,说明它们可能都是与衰老有关的基因,而且它们都会受到盐胁迫的诱导表达,参与逆境胁迫应答。同时我们对野生型拟南芥、AtCa N2和At Ca N1基因的过表达和突变体拟南芥株系在Na Cl胁迫处理情况下的表型和一些生理指标进行分析。结果发现,不论是AtCa N2基因过表达的拟南芥还是AtCa N1基因过表达的拟南芥在盐处理的情况下长势都弱于野生型,活性氧DAB染色也更深,H2O2含量更高,说明AtCaN2基因和AtCaN1基因在参与盐胁迫应答时起负调控作用,它们的过量表达使得植株对盐更加敏感。由于atcan2突变体和atcan1突变体对盐处理表现出较强的抗性,所以我们通过人工杂交的方式,获得了At CaN2和AtCaN1基因的纯合双突变体,推测其会有更强的抗性。以期通过对它们的研究,更进一步了解拟南芥Ca2+依赖性核酸酶基因参与逆境胁迫应答的机制。
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