【摘 要】
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目的: 1.观察正常生育妇女月经周期中血清leptin水平的变化规律,初步探讨leptin与生殖的关系。 2.检测正常妇女血清及卵泡液中leptin的浓度,及人黄素化颗粒细胞leptin受体
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目的: 1.观察正常生育妇女月经周期中血清leptin水平的变化规律,初步探讨leptin与生殖的关系。 2.检测正常妇女血清及卵泡液中leptin的浓度,及人黄素化颗粒细胞leptin受体蛋白的表达,探讨leptin是否对卵巢具有直接作用。 3.体外观察leptin对人卵巢黄素化颗粒细胞雌、孕激素生成的影响。 方法: 1.35例月经周期正常生育妇女在月经周期第二天、第八天、排卵后第一天和排卵后第六天晨起抽血留取血清,-20℃保存。 2.卵泡液及黄素化颗粒细胞取自南方医院生殖医学中心36例行IVF-ET患者,均为输卵管因素或男方因素不孕者。 3.人卵巢黄素化颗粒细胞纯化后体外培养,观察不同浓度人重组leptin蛋白对颗粒细胞雌、孕激素分泌的影响。 4.采用ELISA方法检测卵泡液和血清中leptin浓度。采用免疫细胞化学方法检测leptin受体在人卵巢黄素化颗粒细胞的表达。采用放射免疫方法测定颗粒细胞培养上清中雌二醇及孕酮浓度。 结果: 1.正常生育妇女月经周期中血清leptin浓度存在一定的规律性。排卵后水平显著高于排卵前(P<0.05);排卵后第6天时显著高于排卵后第1天(P<0.05),但具有显著的相关性(P>0.05)。 2.梦泡液中存在leptin蛋白,平均浓度为1928 士422ng/ml,十应血清leptin浓度为2002士345ng/ml,二者无明显的统计学差异(P005)。 3.在人卵巢黄素化颗粒细胞上检测到leptin受体蛋白的表达。 4,L.eptin对颗粒细胞雌、孕激素生成的影响: a.在无hMG作用时,leptin对黄素化颗粒细胞雌二醇与孕酮的生成无影响 ( > 0仍)。 b.Leptin抑制hMG对颗粒细胞雌二醇生成的促进作用,呈浓度依赖性。在我们观察的浓度范围内,随leptin浓度增加,其对雌二醇生成的抑制作用加强(Prt00); c.Leptin对hMG促颗粒细胞生成雌二醇的抑制作用与hMG的浓度有关,hMG浓度小于05IU/ml时,leptin对雌二醇生成无影响(PTh00XhMG浓度大于 0.slUAnl时,雌H醇的生成受到抑制(Pnd00); d,Leptin对hMG诱导的人黄素化颗粒细胞孕酮生成无明显抑制作用(>005)。 结论: ].卵泡液中的leptin浓度与血清中leptin浓度无统计学差异,而巳具有显著的相关性,卵巢本身不产生lePtin,提示卵泡液中的ePtin可能来自血清,并通过其受体作用于颗粒细胞而参与卵巢功能的调节。 ZLeptin通过旁分泌作用影响卵巢的内分泌功能,在黄体期leptin具有抑制FSH和 LH对雌激素生成的促进作用,而并不抑制其对孕激素生成的促进作用,这有利于促进子宫内膜从增殖期向分泌期转化。 3.正常生育妇女月经周期中血清leptin水平在排卵后第六天,即胚胎种植窗期最高,提示leptin是否在胚胎着床中发挥某种生物学作用。
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