【摘 要】
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[目的] 本研究旨在通过检测TNF-α、MMP-13及整合素的表达和软骨细胞及细胞外基质的病理组织学变化来探讨推拿手法对骨关节炎的治疗机理及作用,为推拿手法延缓和治疗关节软
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[目的] 本研究旨在通过检测TNF-α、MMP-13及整合素的表达和软骨细胞及细胞外基质的病理组织学变化来探讨推拿手法对骨关节炎的治疗机理及作用,为推拿手法延缓和治疗关节软骨退变提供理论依据。 [方法] 1OA动物模型的建立及病理组织学、血清学观察 16只健康新西兰大白兔,随机分成4组,每组4只,即正常组、模型组(根据驱赶时间分为4周、6周、8周组),通过手术使模型组实验兔双后肢髌韧带内侧缺损2/3,术后允许自由活动,6至8周后模型建立,以不作任何处理正常组实验兔作为对照组;到时间点后检测各组实验兔血清中TNF-α、MMP-13水平和膝关节X线表现,膝关节软骨标本经HE、番红0及甲苯胺蓝染色后光镜下观察病理组织学改变。 2模拟按压手法对实验兔膝骨关节炎的治疗 36只健康新西兰大白兔,随机分为6组,每组6只,即正常组、模型组和治疗组(根据治疗手法不同再分成4组),除正常组外,其余30只实验兔采用上法建立骨关节炎模型,8周后对治疗组治疗,按压部位:患膝关节髌骨上下极、左右中点及血海、犊鼻穴;在随机分组的基础上于上述各部位分别以60次/分和100次/分的频率点压,每处2分钟,按压力分别为250g和500g,隔天治疗一次,连续治疗6周。对照组不做任何治疗。6周后,检测各组实验兔血清中TNF-α、MMP-13水平,膝关节软骨标本经HE、番红0及甲苯胺蓝染色后光镜下观察病理组织学改变,并用免疫组化检测软骨细胞整合素α1β1的表达。 [结果] 1OA动物模型的建立及病理组织学、影像学和血清学观察 (1)肉眼观察可见模型6周、8周组膝关节软骨面不光滑,X线示膝关节内外侧间隙不等; (2)病理组织学可见到软骨退变征象:HE染色见软骨表层不平、软骨细胞簇集现象,番红0和甲苯胺蓝染色有失染现象; (3)模型6周、8周组与正常组比较,Mankin评分及血清TNF-α、MMP-13水平差异有统计学意义(P<0.05)。 2模拟按压手法对实验兔膝骨关节炎的治疗 (1)病理组织学:治疗组与模型组比较,软骨细胞簇集和基质失染现象有减轻趋势,但未达到正常组水平; (2)各治疗组与模型组比较,Mankin评分及血清TNF-α、MMP-13水平差异有统计学意义(P<0.05),各治疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05); (3)免疫组织化学染色结果发现治疗组与模型组比较,整合素α1β1表达无明显差别,但均较正常组表达高。 [结论] 采用手术破坏兔后肢双侧膝关节髌韧带,使其髌韧带内侧2/3缺损,强迫其运动的方法可建立膝关节骨性关节炎的动物模型;软骨形态学及血清学检测显示,按压手法通过改变关节内应力环境,调节TNF-α、MMP-13和整合素α1β1的表达来抑制软骨细胞的凋亡,刺激软骨细胞的修复与再生,促进细胞外基质的代谢,从而起到抑制关节软骨退变的作用。
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