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PCBP2是核不均一核糖核蛋白(hnRNP)家族成员之一,能特异性结合富含胞嘧啶RNA片段,在细胞生理过程中发挥着重要的作用,例如参与转录后的调控、与microRNA、蛋白相互作用。PCBP2也是宿主细胞分泌的细胞因子之一,近些年研究PCBP2与病毒之间的相互关系的报道越来越多,发现PCBP2能参与多种病毒RNA的复制过程,还能调控细胞的免疫应答反应。PCBP2影响丙型肝炎病毒(HCV)、新城疫病毒(NDV)病毒RNA的复制已有报道,但是PCBP2在病毒诱导肝细胞产生Ⅰ型干扰素中的具体作用却未见报道。
本文主要探讨了PCBP2在病毒诱导肝细胞产生Ⅰ型干扰素中的作用,首先我们设计了沉默PCBP2基因的shRNA,将其插入到新型载体pSilencer后转染到肝细胞HLCZ01中,成功建立了对PCBP2基因沉默效果在60%-90%左右的稳定细胞系。以此为基础,我们使用了体外合成的的双链RNA试剂poly(I∶C)刺激细胞,结果发现沉默PCBP2,细胞内IFNβ的表达量上调;使用单股负链RNA病毒NDV感染细胞,发现沉默PCBP2,细胞内NDV水平下调,但是IFNβ以及其下游四种干扰素刺激基因ISG12a、ISG56、ISG60以及G1P3的表达量明显上调;最后采用单股正链RNA病毒HCV感染细胞,发现沉默PCBP2可抑制HCV的复制水平,同时促进IFNβ以及ISG12a、ISG56、ISG60以及G1P3的表达水平。由此可见,沉默PCBP2,细胞内病毒量下调,IFNβ表达水平上调,PCBP2负调控病毒诱导肝细胞产生Ⅰ型干扰素。
全球约有1.7亿人因感染HCV而诱发各种肝脏类的疾病,但是目前临床上缺乏有效治疗HCV的药物,因此开发新型有效的抗HCV药物迫在眉睫。目前以PCBP2为靶点的抗病毒性疾病的治疗研究刚刚起步,但已显现出了广阔的前景。本研究表明PCBP2与干扰素抗病毒作用负相关,因此我们可以将PCBP2作为研究的靶点分子,尝试研发新型的抗HCV药物,这能为病毒性疾病的治疗提供一个新视野。