【摘 要】
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作者借助公共ESTs数据库,利用NCBI中的电子差异展示(digitaldifferentialdisplay,DDD)软件,从筛查小鼠睾丸中有高表达而在其他组织中不表达或低表达的差异ESTs入手,成功克隆
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作者借助公共ESTs数据库,利用NCBI中的电子差异展示(digitaldifferentialdisplay,DDD)软件,从筛查小鼠睾丸中有高表达而在其他组织中不表达或低表达的差异ESTs入手,成功克隆到一个在小鼠睾丸中高表达的新基因mtLR1,并对该基因的功能进行了初步研究。进行了mtLR1基因的克隆及序列生物信息学分析总结了mtLR1基因功能的初步研究RT-PCR结果显示mtLR1基因在睾丸组织中特异表达的特性,该基因的表达模式与生精过程紧密相关,可能在减数分裂过程和精子的成熟过程中起作用。
通过同源搜索,克隆了一个在小鼠ES细胞中高表达的基因-mHemk,并对该基因的功能做了初步的研究。为研究mHemk基因编码产物的特征,构建了增强型绿色荧光蛋白与mHemk的真核表达载体,脂质体介导的转染实验显示mHemk蛋白主要存在于细胞浆,与生物信息学预测结果一致。
流式结果分析表明,与对照组比较,转染mHemk基因的ESCs和P19细胞株的细胞周期中G0/G1期比例增加,S和G2期比例减少,提示mHemk基因的过表达能延缓G1→S的进程,从而抑制细胞的过度增殖。结合mHemk基因的生物信息学特征分析和得出的实验结果,我们认为:该基因可能在维持ESCs不分化过程和哺乳动物胚胎早期发育过程中起着重要的作用。
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