肿瘤抗原致敏的树突状细胞诱导膀胱癌细胞体外杀伤作用的初步研究

• 作 者: 杨惠祥
• 出 处: 青岛大学
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 树突状细胞 膀胱癌 杀伤 IL-12 生物治疗

[目的] 研究不同肿瘤抗原提取物致敏的树突状细胞所诱导的对膀胱癌细胞系的体外杀伤作用，探讨以DC为基础的瘤苗治疗膀胱癌的可行性。 [方法] 联合应用rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-α可从健康志愿者外周血中培养出DC。将1×10~7膀胱癌细胞株BIU-87细胞以枸橼酸-磷酸盐缓冲液洗脱或反复冻融4次后获取抗原，检测蛋白含量，再与同种异体DC混合培养，获得致敏的DC。然后将后者与自身T淋巴细胞共同孵育，得到致敏的细胞毒性T细胞(CTL)，将两组CTL与BIU—87共同培养，应用乳酸脱氢酶释放法分析其对膀胱癌细胞的杀伤效果，并用ELISA法检测DC分泌IL-12的能力。 [结果] 1．用枸橼酸-磷酸盐缓冲液洗脱或反复冻融BIU-87(1×10~7)后，获得的肿瘤抗原蛋白含量分别为(426.0±4.3)μg和(681.0±5.6)μg；2．经乳酸脱氢酶释放法检测，负载酸洗脱的膀胱癌细胞抗原的DC致敏的CTL和负载冻融抗原的DC致敏的CTL对BIU—87有明显的杀伤作用，而且，负载酸洗脱肿瘤抗原的树突状细胞致敏的特异性CTL对BIU—87有更明显的杀伤作用，差异具有明显显著性(p＜0.05)；3．用ELISA法检测，不同时期的树突状细胞分泌的IL-12 p70量不同，随着培养时间的延长，DC分泌IL-12的能力也随之增强(p＜0.05)，同时不同抽提抗原的方法对IL-12 p70分泌量有影响，负载酸洗脱肿瘤抗原的DC分泌量比负载冻融肿瘤抗原的DC分泌量多，差异也具有明显显著性(p＜0.05)。 [结论] DC是功能最强大的抗原提呈细胞，联合应用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF能够从健康人外周血中诱导出DC，加入rhTNF-α可以促进其成熟；膀胱癌细胞株BIU—87通过弱酸洗脱和反复冻融可以获取肿瘤抗原，用其冲击致敏DC，可以使DC分泌更多的IL-12，这在DC刺激CTL的过程中发挥重★中文摘要要的作用;以上法获取的DC可以高效活化CTL，后者对膀肤癌细胞株发挥肿瘤特异性杀伤作用。这提示以DC为中心的肿瘤生物治疗有望提高膀肤癌综合治疗水平。