千金藤素增敏多柔比星抑制三阴性乳腺癌细胞增殖的机制

• 作 者: 张岩昊
• 机 构: 陆军军医大学
• 出 处: 陆军军医大学
• 发表日期: 2020年期
• 关键词: 三阴性乳腺癌

背景：
　　乳腺癌是女性人群中发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。在其中由于三阴性乳腺癌的异质性，其治疗只能以手术，化疗为主。但是由于肿瘤细胞诸如产生耐药性，对化疗药物不敏感等现象的出现，临床上对其治疗难度日益增加。
　　抑制肿瘤细胞自噬过程，从而增加肿瘤细胞对化疗的敏感性，是一种被广泛接受的抗肿瘤策略。越来越多的研究表明，自噬抑制剂与化疗药物联用可以协同增强化疗药物对肿瘤生长和增殖的抑制。来自中药千金藤的活性天然产物——千金藤素是一种良好的自噬抑制剂，我们初步研究结果显示其可以协同多柔比星抑制三阴性乳腺癌增殖。但其具体的分子机制尚不明确。
　　目的：
　　1.明确千金藤素增敏多柔比星对乳腺癌化疗的效果。
　　2.阐明千金藤素增敏多柔比星对乳腺癌化疗的分子机制。
　　3.为将千金藤素与多柔比星联用的策略用于临床治疗三阴性乳腺提供理论依据。
　　研究方法
　　MTT实验检测细胞活性；流式细胞仪检测细胞凋亡和ROS；Western Blot检测细胞内蛋白表达水平；免疫荧光及激光共聚焦方法观察自噬体/线粒体自噬体和线粒体分裂；透射电镜观察细胞内自噬体的改变；构建裸鼠移植瘤模型检测药物体内抗肿瘤效果。
　　结果：
　　1.千金藤素可增敏多种化疗药物尤其是多柔比星对三阴性乳腺癌化疗的效果；二者在较低的浓度下呈现良好的协同效应。
　　2.千金藤素和多柔比星联用可诱导三阴性乳腺癌 MDA-MB-231和 MDA-MB-468细胞线粒体膜电位降低，线粒体损伤和细胞凋亡。
　　3.千金藤素协同多柔比星导致MDA-MB-231细胞中Cofilin去磷酸化激活和线粒体转位，进而促进线粒体损伤和细胞凋亡。转染模拟 Cofilin磷酸化态的质粒可以明显抑制千金藤素协同多柔比星诱导的细胞凋亡。
　　4.千金藤素协同多柔比星可以导致MDA-MB-231细胞内线粒体自噬体堆积，ROS显著增加；清除ROS可以明显抑制千金藤素和多柔比星联用诱导Cofilin线粒体转位和细胞凋亡。抑制自噬体的形成可以明显抑制千金藤素协同多柔比星诱导的细胞 ROS水平升高。
　　5.千金藤素协同多柔比星可以明显抑制裸鼠移植瘤肿瘤的生长，延长裸鼠的生存时间，诱导肿瘤组织细胞发生凋亡。
　　结论：
　　1.千金藤素协同多柔比星可以诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡。
　　2.千金藤素协同多柔比星可以导致三阴性乳腺癌细胞内线粒体自噬体堆积，从而使细胞内ROS水平升高，导致Cofilin去磷酸化激活和线粒体转位，促使线粒体分裂和细胞凋亡。
　　3.千金藤素协同多柔比星可以在体内产生良好的抗肿瘤效果。