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狂犬病由狂犬病病毒引起，是一种带有神经症状的疾病，临床上主要导致脑脊髓炎。机体主要通过破损的皮肤或粘膜感染这一病毒，后经神经末梢进入中枢神经，最终机体死于脑脊髓炎。作为一种动物疫源性疾病，数千年来，狂犬病给人类的安全造成了极大的危害。在亚洲和非洲，每年人狂犬病的发生事件多数由动物所导致。但是在这些地区，动物免疫却一直被严重的忽略了。加强对动物的监管，提高犬、猫等与人类接触频繁免疫率是控制人类狂犬病发生的有效方法，而对动物进行免疫最佳途径是口服免疫。目前，国内的兽用疫苗，很难推广口服使用。因此，开发一种免疫力高、可口服、成本低廉的狂犬疫苗对狂犬病的防控具有积极作用。病毒活载体疫苗在新型疫苗的研发上起到了重要的作用。伪狂犬病毒作为一种常用的疫苗载体，在过去的30年间，这一载体以其诸多优点得到了广泛的应用。伪狂犬病毒不仅可以感染猪，还可以感染包括犬和猫在内的其他动物。通过粘膜感染机体是该病毒的一大特征，这一侵入机制目前也较为清晰。Bartha-K61是一株应用广泛的疫苗株，清楚的基因背景为其作为疫苗载体在安全性上提供了有力保障。狂犬病病毒糖蛋白是病毒的唯一表面蛋白，也是诱导机体产生中和抗体的唯一蛋白。为了构建表达狂犬病病毒SRV9株的重组活载体疫苗，本试验构建了以Bartha-K61为载体，以报道基因LacZ和SRV9株糖蛋白为外源基因的重组疫苗,为了避免表达的糖蛋白分子构象发生改变，本试验中针对LacZ与SRV9构建了两个独立表达盒。通过同源重组方法得到的重组病毒最终命名为rPRV-LacZ-G，该重组病毒经数次蓝色噬斑筛选纯化后，对其一些生物学特征进行了研究。结果表明，重组病毒可包装出完整的病毒粒子，病毒生长增殖周期与其亲本毒株相当，而病毒滴度略有下降。在体外研究中发现，在细胞水平上，该病毒可有效表达SRV9株糖蛋白基因。重组病毒分别以肌肉注射和口服免疫的方式对小鼠和猫进行了免疫实验。经Western blot检测表明，重组病毒可以刺激机体，产生抗狂犬病糖蛋白的特异性抗体。而荧光抗体中和试验的结果表明，这一重组病毒在免疫鼠和猫中可产生一定的保护效力，但口服免疫的保护率低于肌肉注射。本试验获得表达狂犬病病毒糖蛋白的重组病毒rPRV-LacZ-G，对获得的重组病毒进行生物学和免疫学验证。动物免疫结果表明，该重组病毒能够刺激机体产生抗狂犬病中和抗体。本研究对研制狂犬病病毒重组疫苗奠定了基础。