脂多糖下调泡沫细胞ABCA1的表达与核因子-κB途径相关

• 作 者: 曹冬黎
• 机 构: 南华大学
• 出 处: 南华大学
• 发表日期: 2008年01期
• 关键词: 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 Toll样受体 NF-κB 肝X受体 胆固醇流出

目的:脂多糖(LPS)与Toll样受体4 (TLR4)结合后启动细胞内多条信号转导通路,包括激活转录因子NF-κB途径从而与人动脉粥样硬化病变中炎症的激活相关。本文观察LPS对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达和胆固醇流出的影响,并探讨LPS对ABCA1的作用是否与TLR4-NF-κB途径相关以及LPS是否通过LXRs调控ABCA1的表达。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度(0,0.2,2,20,200 ng/ml)的LPS处理或者用20 ng/ml LPS作用不同时间(0,6,12,24h);以20 ng/ml LPS单独或20μM的NF-κB抑制剂对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基甲酮(N-p-Tosyl-L-phenylalanine chloro- methyl ketone, TPCK)预处理细胞2h再加入LPS处理24小时,运用油红O染色观察细胞内脂滴含量的变化,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测ABCA1、TLR4和LXRαmRNA表达情况,Western印迹法检测ABCA1、LXRα及核内NF-κB p65蛋白质的表达水平。结果:LPS可以使THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞细胞内脂滴增多,胆固醇流出减少,细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯增加,呈浓度和时间依赖性抑制ABCA1 mRNA及蛋白质的表达,而TLR4 mRNA和核内NF-κB p65蛋白质的表达水平增加。用NF-κB途径抑制剂TPCK预处理后,LPS的这种作用可以被部分抑制。LXRαmRNA和蛋白质的表达均不受LPS和TPCK的影响。结论:LPS抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达和细胞内胆固醇流出,促进细胞内脂质蓄积,TLR4-NF-κB信号途径介导LPS对ABCA1的抑制作用,而LPS对ABCA1表达的调控不通过LXRα途径。