论文部分内容阅读
本试验以原代培养鲤鱼肠上皮细胞为研究模型，主要研究大豆β—伴球蛋白提取物对鲤鱼肠上皮细胞增殖及其功能影响。试验共设6个处理（1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6），每个处理设4个重复，每个重复1孔，在26℃培养72h后分别换为含大豆β—伴球蛋白提取物0、0.25、0.6、0.9、1.2和2.5mg/ml的培养液，继续培养38h，并分别在换液后12h、24h、36h观察细胞的形态和生长情况。 结果表明：大豆β—伴球蛋白提取物处理细胞培养12h，大部分细胞贴壁生长，形成小的细胞集落，少量细胞悬浮，细胞呈圆形，不同处理的细胞数量未发生明显改变；培养至24h，对照组贴壁生长细胞数量增多，细胞呈圆形，添加大豆β—伴球蛋白提取物各个处理细胞轮廓不清楚，细胞发生脱落，脱落程度随着大豆β—伴球蛋白提取物浓度增加而增大；培养至36h，对照组贴壁生长细胞数量继续增加，细胞呈圆形，添加大豆β—伴球蛋白提取物各个处理细胞轮廓不清楚，细胞多呈现不规则形状，细胞脱落，脱落程度随着大豆β—伴球蛋白提取物浓度增加而持续增大。大豆β—伴球蛋白提取物对细胞MTT 0D值、培养液乳酸脱氢酶活力、培养液碱性磷酸酶活力、培养液谷丙转氨酶活力、培养液谷草转氨酶活力、细胞谷草转氨酶活力、细胞Na+，K+-ATP酶活力、细胞总蛋白量、细胞蛋白沉积量等有极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）的影响，随着大豆β—伴球蛋白提取物浓度的增加，细胞MTT 0D值极显著降低（P＜0.01），细胞总蛋白量、细胞蛋白沉积量、细胞谷草转氨酶活力等显著降低（P＜0.05），培养液碱性磷酸酶活力、培养液谷丙转氨酶活力、培养液谷草转氨酶活力等极显著升高（P＜0.01），培养液乳酸脱氢酶活力显著升高（P＜0.05），但对细胞氨总产量无影响（P＞0.05）；相关分析表明：细胞MTT 0D值与大豆β—伴球蛋白提取物浓度呈极显著的三次曲线相关（r1=-0.9560，P＜0.01）；培养液乳酸脱氢酶活力、培养液谷草转氨酶活力分别与大豆β—伴球蛋白提取物浓度呈显著的线性相关（r1=+0.838，P＜0.05；r2=+0.902，P＜0.05）。 综上试验结果表明，在本试验条件下，大豆β—伴球蛋白提取物可以破坏鲤鱼肠上皮细胞结构，影响其完整性，当大豆β—伴球蛋白提取物2.5mg/ml时，引起鲤鱼肠上皮细胞膜和线粒体膜破坏；大豆β—伴球蛋白提取物能够抑制鲤鱼肠上皮细胞增殖，降低鲤鱼肠上皮细胞蛋白质沉积。