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副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)能引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎，随着世界养猪业的发展，该病已成为全球范围内影响养猪业的一种重要细菌学疾病。近年来，随着我国规模化养猪的发展，副猪嗜血杆菌感染有明显增加趋势，已成为猪场保育仔猪发病率和死亡率增加的重要原因之一，并给养猪业造成重大经济损失。本文从副猪嗜血杆菌的PCR检测、广东省副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其生物学特性3个方面进行了系统研究，结果如下。
1．副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立副猪嗜血杆菌营养要求比较苛刻，常规生化试验检测方法比较烦琐。本研究参考Oliveira et al 发表的副猪嗜血杆菌16S rRNA基因特异性PCR引物序列，合成一对PCR引物，通过PCR反应条件的优化、特异性和敏感性的测定、及细菌DNA提取方法的选择，建立了一种快速、简洁、准确的PCR方法用于检测副猪嗜血杆菌。PCR扩增片段为编码16S rRNA的DNA片段，大小为822bp，最小检出量为180CFU/mL。与猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌Ⅰ型、Ⅶ型和链球菌无特异性反应。
2．广东省副猪嗜血杆菌的分离鉴定本研究采用加有NAD和小牛血清的TSB和TSA培养基接种方法，从广东省南海、高明、水台、江门、湛江五个县市的多个发病猪场收集的85份病料中分离到6株具有多形性的革兰氏阴性球杆菌。PCR诊断、序列分析、培养特性和生化鉴定表明，这六株分离株为副猪嗜血杆菌。药敏试验表明：这六株副猪嗜血杆菌分离株对头孢类药物、喹诺酮类、氟喹诺酮类药物及庆大霉素敏感，对复方磺胺类药物、大环内酯类抗菌素及氯霉素敏感性略有不同，对四环素、氨苄青霉素具有耐药性。
3．广东省副猪嗜血杆菌分离株的生物学特性以副猪嗜血杆菌分离株中的Hps6为代表菌株对其部分重要生物学特性进行研究。对培养基中不同的NAD和小牛血清对HPS生长的影响的研究结果表明，副猪嗜血杆菌在含有2.0％小牛血清和16μg/mLNAD的TSB培养基中生长最好。副猪嗜血杆菌在接种TSA平板12h后才可长出肉眼可见针尖大小菌落。副猪嗜血杆菌在TSB液体培养基中的生长曲线显示培养16～18h培养基中的活菌数达到最高峰，但从20h开始活菌数即下降。致病性试验表明，Hpsl～Hps6对小鼠的半数致死量(LD<,50>)分别为2.03×10<9>， 5.3×10<9>，1.34×10<10>， 7.0×10<9>，1.17×10<10>， 1.62×10<9>。HPS接种豚鼠后，表现被毛蜷缩、虚弱、呼吸困难、死亡。剖检可见心包膜增厚、发白，肺脏表面有针尖大小出血点，腹腔有少量积液。取死亡豚鼠各器官进行PCR检测，部分可检测出副猪嗜血杆菌。