【摘 要】
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马铃薯（Solanum tuberosum L.）是茄科茄属多年生草本植物，是我国和世界第四大粮食作物。在影响马铃薯生产的诸多外部因素中，影响最大的是由致病疫霉（Phytophthora infestans （Mont.
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马铃薯（Solanum tuberosum L.）是茄科茄属多年生草本植物，是我国和世界第四大粮食作物。在影响马铃薯生产的诸多外部因素中，影响最大的是由致病疫霉（Phytophthora infestans （Mont.） de Bary）引起的马铃薯晚疫病。目前从分子的角度入手研究马铃薯晚疫病致病疫霉菌的致病基因是近年来研究的热点。本实验室前期研究已经建立了一套提取纯化致病疫霉菌代谢产物的体系，并利用液质联用技术分析得到了16个蛋白序列，其中2个为膜联蛋白，本研究选取了其中一个进行研究，以明确该蛋白是否对马铃薯叶片具有毒害作用，同时对已经得到并已明确有毒害作用的pipme1基因成功构建了绿色荧光蛋白表达载体。以菌株LSX18为实验对象，Trizol法提取菌丝总RNA，以XP002897238的核苷酸序列为模版设计引物，克隆出一个膜联蛋白基因，命名为anx-1（KJ624634）。anx-1序列全长987bp，包括一个987bp的完整开放阅读框，编码一个含328个氨基酸的蛋白，理论分子36.211kDa，等电点为5.54。将anx-1基因进行原核表达，将表达蛋白接种于马铃薯离体叶片上，供试叶片未出现类似晚疫病的水渍状坏死斑。因此，确定anx-1表达的膜联蛋白不是引起马铃薯晚疫病、导致组织坏死的因素之一。同时，根据已知的具有毒性的pipme1基因序列成功构建了一个绿色荧光蛋白真核表达载体，该研究将有助于深入研究该病原菌与寄主互作的分子机制，为研究马铃薯晚疫病致病机制提供依据。
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