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目的：
1、通过统一的调查方法、标本采集，利用基因诊断方法对我院门诊非综合征型耳聋(nonsyndromichearingimpairment，NSHI)患者及其家系成员进行GJB2和线粒体DNA(mtDNA)1555位点突变检测研究，分析GJB2和mtDNAA1555G基因突变在NSHI发病中的作用。
2、分析携带GJB2和mtDNAA1555G基因突变患者的家系情况及临床特征，为患者家庭提供准确的病因学分析和遗传咨询。
方法：
1、收集2006年4月-2007年12月我院NSHI患者家系48个，抽取包括耳聋患者62例及其家庭成员57例共119份外周血液标本，其中接受人工耳蜗(cochlearimplant，CI)植入术的患儿16例；
2、收集相关临床资料，并将患者分为小儿组和成人组；
3、对CI植入者在接受耳聋基因检测前均进行颞骨薄层CT扫描及MRI耳蜗水成像；
4、提取所采集血液标本的基因组DNA：
5、用聚合酶链反应(PCR)扩增技术对所有患者及其家系成员的核基因组和线粒体基因组进行扩增筛查，对线粒体基因组的PCR产物经纯化后进行测序分析；对核基因的PCR产物纯化后直接进行GJB2基因全序列测序分析；
6、对GJB2和mtDNAA1555G基因突变阳性患者家系进行系谱分析，为患者家庭提供准确的病因学分析和遗传咨询。
结果：
1、在我院收集的48个NSHI家系中检出16个家系携带致聋基因突变，为遗传性耳聋家系。119份外周血液标本中测出35例携带致聋基因突变，总检出率为29.4％，其中GJB2基因突变的检出率为15.1％(18/119)，8例为235delC纯和突变，检出率为6.7％，10例235delC杂和突变，检出率为8.4％，235delC等位基因的检出率为23.5％；mtDNAA1555G突变的检出率为14.3％(17/119)。
2、48个NSHI耳聋家系的先证者中有15例患者携带致聋基因突变，检出率为31.3％，包括8例(16.7％)为GJB2基因突变，7例(14.6％)为mtDNAA1555G突变；62例NSHI耳聋患者中有22例患者携带致聋基因突变，检出率为35.5％，包括9例(14.5％)为GJB2基因突变，8例为235delC纯合子，1例为235delC杂和子，13例(21.0％)为mtDNAA1555G突变。
3、小儿组39例患儿中共检测到25.6％(10/39)的致聋基因突变，其中8例患儿为(20.5％)为GJB2基因突变，类型均为235delC纯和突变，2例(5.1％)为mtDNAA1555G突变。3例有明确氨基糖苷类抗生素(aminoglycosideantibiotics，AmAn)使用史的患儿中检出2例mtDNAA1555G突变，检出率为66.7％。12例有耳聋家族史的患儿中检出4例有明确的致病突变，检出率为33.3％。
4、成人组23例患者中检测到52.2％(12/23)的致聋基因突变，其中11例为(47.8％)为mtDNAA15556突变，1例(4.3％)为GJB2基因突变，类型为235delC杂和突变。8例有明确AmAn使用史的患者中检出4例携带mtDNAA1555G突变，检出率为50％。22例有耳聋家族史，其家系中至少2人罹患耳聋，检出12例有明确的致病突变，检出率为54.5％。在检出有致病耳聋基因的患者家族中均有其他成员患罹患耳聋，携带mtDNAA1555G突变者36.4％有明确的AmAn使用史。
5、48个NSHI家系中听力正常的家系成员血液标本共57份，检测到13例(22.8％)携带致聋基因突变，其中9例(15.8％)为GJB2基因突变，均为235delC杂和子，4例(7.0％)为mtDNAA15556突变。
结论：
1、在我院收集的119份外周血液标本中测出35例携带致聋基因突变，总检出率为29.4％，48个NSHI耳聋家系检出16个家系携带致聋基因突变，为遗传性耳聋家系。48个先证者中有15例患者携带致聋基因突变，检出率为31.3％，其中16.7％为GJB2基因突变，14.6％为mtDNAA1555G突变；62例NSHI耳聋患者中有22例患者携带致聋基因突变，检出率为35.5％，包括14.5％为GJB2基因突变，21.0％为mtDNAA1555G突变。提示本地区有较高的GJB2基因突变和mtDNAA1555G突变。
2、在小儿组GJB2基因突变、mtDNAA1555G突变的检出率分别为20.5％、5.1％，而成人组分别为47.8％、4.3％，两组存在明显的组间差异，具有统计学意义。提示GJB2突变是先天性耳聋的主要原因，mtDNAA1555G突变是后天性耳聋的主要原因。
3、本组数据中，示携带mtDNAA1555G突变的同一家系和不同家系间母系成员间的发病年龄、听力损失程度和耳聋外显率都不同，表明除mtDNAA1555G突变外，AmAn、核基因和线粒体单体型做为修饰因子参与A1555G突变造成的耳聋表型。
4、耳聋患者致聋基因突变检出率为35.5％，其家系中听力正常者致聋基因突变检出率为22.8％，提示耳聋的致病因素中遗传因素占重要地位，耳聋患者的家系成员有携带致聋基因突变的风险，其后代患病几率较正常人高。
5、耳聋基因诊断，为耳聋患者家庭提供准确的病因学分析和遗传咨询提供重要信息。虽然患儿耳聋表型相同，且父母一般听力正常，但遗传咨询和产前诊断的内容应根据基因突变的不同而有所差异。