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研究背景及目的:WWOX基因是一个位于染色体脆性位点FRA16D(16q23.3-24.1)的基因,它编码一种包括两个位于N-末端的WW域和一个位于C-末端的SDR(短链脱氧还原酶)位点的相对分子质量约为46kDa的蛋白。其中,WW域与蛋白质和蛋白质之间的相互作用有关。短链脱氧还原酶具有催化类固醇底物的作用,因此,WWOX在一些与类固醇相关的组织中起重要作用,例如前列腺、卵巢和乳腺。且WWOX作为一个抑癌基因,目前已在骨肉瘤、乳腺癌、卵巢癌等方面有报道证实。JNK(c-Jun氨基末端激酶)是MAPKs(丝裂原活化蛋白激酶)超家族中的一个亚类。JNK蛋白激酶包括JNK1、JNK2和JNK3,它们分别由JNK1、JNK2和JNK3基因编码,相对分子量分为46kD和54kD两种。三种JNK亚型在高等动物体内表达和分布存在差异,其中JNK1和JNK2几乎在所有组织器官中的细胞中都有表达,而JNK3仅在某些特定组织中表达,如心脏、睾丸等。JNK信号传导通路作用广泛,参与细胞的多种生理活动,在细胞代谢、炎性反应、应激反应、细胞分化和凋亡等过程中扮演重要角色。而且,JNK在肿瘤的起因和生长变化过程中发挥着相关作用。现已证实在 HCC(Hepatocellular Carcinoma,肝细胞癌)中 JNK 与 WWOX相互作用并抑制WWOX的抑癌作用。然而,JNK在肝癌和乳腺癌中所起的作用是截然相反的。目前在乳腺癌中WWOX与JNK是如何表达及其相关性尚未有研究。遂本研究旨在通过实验,检测乳腺癌组织与癌旁组织中WWOX与JNK的表达情况,来探讨WWOX与JNK在乳腺癌中表达的相关性及其与临床病理指标之间有无联系。研究方法:收取山东大学齐鲁医院F6C乳腺外科自2016年1月至2017年2月期间收治行手术治疗的乳腺癌患者术后的癌及癌旁组织标本40例,患者均为女性,中位年龄52岁(年龄范围37至77岁)。患者术前未行放疗、化疗及靶向治疗等其他相关特殊治疗,患者术后病理诊断均为浸润性导管癌。收集的乳腺标本放入冻存盒放置在-80度冰箱中冷冻,以备以后使用。采取RT-PCR实验来检测标本中WWOX和JNK的mRNA表达。采取Western blot及免疫组化实验来检测标本中WWOX和JNK蛋白的表达,并对患者的相关信息进行统计(如年龄、组织学分级、免疫组化指标、腋窝淋巴结转移情况等等),用SPSS23.0统计软件对相关数据进行分析,X2检验分析WWOX和JNK蛋白表达与患者临床病理指标之间的关系。研究结果:一、WWOX与JNK在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达水平及相关性1、RT-PCR实验结果显示WWOX mRNA在乳腺癌组织中的表达量为(0.34±0.28),低于癌旁组织的表达量(1±0),其统计学差异有意义(P<0.01)。JNK mRNA在乳腺癌组织中的表达量为(0.60±0.32),低于癌旁组织的表达量(1±0),其统计学差异有意义(P<0.01)。WWOX与JNK两者mRNA在乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.47,P = 0.002)。2、Western blot实验结果显示WWOX蛋白在乳腺癌组织中的表达量为(0.67±0.36),低于癌旁组织的表达量(1.56±0.65),其统计学差异有意义(P<0.01)。JNK蛋白在乳腺癌组织中的表达量为(0.74±0.49),低于癌旁组织的表达量(1.73±0.88),其统计学差异有意义(P<0.01)。WWOX与JNK两者蛋白在乳腺癌组织中表达呈正相关(r=0.603,p<0.01)。3、免疫组化(SP法)实验结果显示WWOX与JNK蛋白在乳腺癌组织及癌旁组织中均有表达;其中77.5%(31/40)的患者WWOX蛋白的表达乳腺癌组织低于癌旁组织,75%(30/40)的患者JNK蛋白的表达乳腺癌组织低于癌旁组织。在患者乳腺癌组织中,WWOX与JNK蛋白表达呈正相关(X2=5.78,r=0.38,P=0.029)。二、乳腺癌组织中WWOX与JNK的表达水平与病理学指标的关系1、免疫组化(SP法)实验测得WWOX蛋白的低表达与乳腺癌患者年龄(P=0.28)、ER(P=0.26)、PR(P=0.28)、Her-2(P=0.09)、P53(P=0.91)、Ki67(P=0.57)、肿瘤分期(P=0.27)均无显著相关性。与淋巴结转移(P=0.01)相关、与肿瘤分级(P=0.001)显著相关。2、免疫组化(SP法)实验测得JNK蛋白的低表达与乳腺癌患者年龄(P=0.57)、肿瘤分级(P=0.41)、ER(P=1.00)、PR(P=0.43)、Her-2(P=0.58)、P53(P=0.70)、Ki67(P=0.81)、肿瘤分期(P=0.43)、淋巴结转移(P=0.71)均无显著相关性。结论:WWOX和JNK在乳腺癌组织中蛋白及mRNA的表达量均低于癌旁组织,WWOX在乳腺癌组织中的表达量低于JNK的表达量,且WWOX与JNK的表达呈正相关。提示WWOX与JNK在乳腺癌组织中存在相互作用,两者参与乳腺癌的发生、发展过程。两者之间的相互联系可能为今后抗癌治疗提供一个新的切入点。