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最早认为VEGF是一种由肿瘤细胞分泌并确实能引起血管通透性增加的蛋白，这种蛋白后来被单独克隆，因其对内皮生长的有丝分裂原作用而被命名为血管内皮生长因子，也称血管通透因子（VPF）或促血管素。VEGF体外可促进血管内皮增殖并诱发高通透性，在许多心血管疾病（如动脉粥样硬化，AS）的发生、发展过程中起重要作用。我们研究了VEGF对体外培养的牛冠状动脉内皮细胞、主动脉内皮细胞、牛脑微血管内皮细胞、牛脑微血管内皮与平滑肌细胞共培养模型对低密度脂蛋白（LDL）通透性的调控作用以及VEGF对SD大鼠脑血管通透性的调控及药物对血管内皮的保护作用。主要结果：1．在体外培养的牛主动脉内皮细胞（BAEC）中研究血管内皮生长因子/血管 通透因子（VEGF）对内皮细胞脂蛋白通透性的影响，将不同浓度的VEGF、 培养基加入牛主动脉内皮细胞单层，与125I—LDL共孵育，在不同的时间段 用SN—695型液闪计数器测其通过细胞单层的百分率。发现VEGF可显著 增强牛主动脉内皮细胞单层对125I—LDL的通透性（P＜0.01），这种增加具有 明显的时效和量效关系。其起效时间为30min，125I—LDL通透率由10.85± 0.6％增加到20.1±0.54％。VEGF从50μg/L起与空白对照差异显著，约1 小时达坪值（通透率由19.64±1.17％升至28.82±0.93％）。2．首次成功建立了牛冠状内皮细胞（BCEC）体外培养方法，经形态学及免疫 染色鉴定为内皮细胞，并观察VEGF对内皮细胞通透性的影响。将不同浓度 的VEGF加入牛冠状动脉内皮细胞单层，与125I—LDL共孵育，在不同的时 间段用SN—695型液闪计数器测其通过细胞单层的百分率。发现在培养的单 层牛冠状内皮细胞中加入纯化的人重组VEGF可显著增加125I—LDL的通透 率（P＜0.001），这种增加具有时间及剂量依赖性，且需要与VEGF共孵育较 长时间（＞24h）。VEGF的起效时间为45min，通透率由5.01±0.18％升至7.05 ±0.82％，其效应随剂量的增加而增大。3．采用SD大鼠研究VEGF/VPF对脑血管通透性的影响，动脉及侧脑室注射 第二军医大学硕士学位论文 VEGr／VPF后再汁射伊义思竺，用分光光度法测脑内伊文思兰染色程度来反 映VEGWVpF的血管通透作用。注射VEGwVPr前30mh动脉或侧脑室给 药观察药物丹酚酸D的抑制作用。发现动脉及侧脑室注射＊D0刊r剂量 依赖性引起脑血管通透性介高，但两种给药力法无显著性差异。静脉注射丹 酚酸 B 0．ling／ml，Iml／kg休重可显著抑制 VEGF的通透作用仪刃．05)，而侧脑 室汁剔儿Iujjff作川n 4．观察了＊＊＊r对休外佃养的牛脑微血管内皮圳胞、平滑肌细胞及内皮细胞／ 平滑肌圳胞共］夹养模刑”’【一LDb通透件的影响。发现VEGr可显著增加内 皮细胞对”’I—LDL的通透性o＜0．of)，这种增加具有时间及剂量依赖性， 起效时间为45min，通透率lh 3．27土队28％升至4．RS士0．42％，最大效应为 2（）0 卜g／LVEGr对平滑肌及内皮细胞／平滑肌细胞共培养模型”’【一LDL通透性 没有影响。 5．药物对VE口r通透性升高作用的抑制作用：将不同浓度的丹酚酸B及普罗 布考加入休外J＃养内皮别胞羊．层，与’‘’l—LDL共孵育，在不同的时间段用 SN—695型液闪己；数器测上〔通过绷胞单层的百分率。丹酚酸B对VEGF诱导 血管内皮通透性升高有显著的抑制作用（p＜o刀1），并有较好的量效关系。 本文结果显示，＊＊＊r可促进体外培养的内皮细胞对＊＊L通透性显著月高， 这种作用具有时间及剂员依赖性，表明其在动脉粥样硬化的形成和发展过程中 起一定作用。药物丹酚酸 B（Sal—b）是丹参水溶件成分丹酚酸的有效成分之 一，体外实验显示，具有强抗氧化及心脑血管保护作用，可防止血栓形成，血 管痉挛等。药物普罗布考（Probucol）既是调血脂剂，又是一种强的抗氧化剂， 可以通过阻止LDL的氧化来延缓动脉粥样硬化的发生。同时证明丹酚酸B及普 罗布考可显著抑制VE＊r促进11m管内皮通透性升高的作用，从另一个侧面证明 药物对心脑血管疾病的有能作用。