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本文研究了黄连提取物和黄连素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S生长增殖的抑制及其对细胞内氧化还原平衡的影响。
方法:MTT法检测药物(黄连提取物、黄连素)和抗氧化剂(NAC、Tocoperol、GSH)对乳腺癌细胞(MCF-7和MDA-MB-435S)生长增殖的作用;流式细胞术检测药物和抗氧化剂对乳腺癌细胞生长周期的影响;Hoechest染色观察药物处理后乳腺癌细胞的形态学变化;GSH和GSSH试剂盒测定药物和抗氧化剂处理后乳腺癌细胞中的GSH和GSSG含量。
结果:黄连提取物和黄连素对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用。黄连素在1μmol/L-4μmol/L浓度范围内对MCF-7细胞的抑制作用随浓度的升高而增加,在2μmol/L-8μmol/L范围内对MDA-MB-435S细胞增殖的抑制作用随浓度的增加而增加。黄连提取物在2μg/ml-32μg/ml浓度范围内对MCF-7细胞和MDA-MB-435S细胞增殖抑制作用随浓度的增加而增加,黄连提取物对MCF-7和MDA-MB-435S细胞48h的IC50分别为12.4μg/ml和9.0μg/ml。抗氧化剂GSH(0.5μmol/L)、NAC(0.5μmol/L)、Tocopherol(0.1μmol/L)能在一定程度上降低黄连提取物在2μg/ml-32μg/ml浓度范围内对MCF-7和MDA-MB-435S细胞的抑制率,其中作用最明显的分别是NAC和Tocopherol。黄连素和黄连提取物使MCF-7细胞G2/M期增加,S期减少,阻滞MDA-MB-435S细胞于G0/G1期。预先用GSH和NAC处理再加入黄连素可以在一定程度上逆转黄连素对MCF-7细胞S期的改变。黄连素和黄连提取物使MCF-7细胞出现凋亡的形态学改变:胞膜完整、胞体缩小、核染色质聚集,附在核周边,密度明显增高,界限清楚。黄连提取物和黄连素可降低乳腺癌细胞中GSH和GSSG的绝对值含量,但GSH/GSSG的比值与对照组相比较没有明显差异。三种抗氧化剂预先处理1h的乳腺癌细胞再分别加入黄连提取物和黄连素,GSH/GSSG的比值同对照组相比较无明显差异。
结论:黄连提取物和黄连素对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用,黄连提取物对MDA-MB-435S细胞的抑制作用大于对MCF-7细胞的抑制作用。黄连提取物和黄连素使MCF-7细胞S期减少,阻断MDA-MB-435S细胞于G0/G1期,在一定浓度下可诱导MCF-7细胞发生凋亡。黄连提取物和黄连素可能对细胞内氧化还原平衡影响甚微。