【摘 要】
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恶性疟原虫PfMAg-1蛋白表达于恶性疟原虫裂殖子表面，该蛋白不存在于感染人类的其它4类疟原虫中。本实验室前期分别表达PfMAg-1对N、C和中段抗原蛋白后免疫新西兰兔，取抗血清进
【出 处】
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北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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恶性疟原虫PfMAg-1蛋白表达于恶性疟原虫裂殖子表面，该蛋白不存在于感染人类的其它4类疟原虫中。本实验室前期分别表达PfMAg-1对N、C和中段抗原蛋白后免疫新西兰兔，取抗血清进行体外培养条件下的疟原虫生长抑制实验，均证实抗PfMAg-1部分片段的特异性抗体对恶性疟原虫生长有抑制作用。为进一步观察PfMAg-1全蛋白的功能，本研究采用规律成簇间隔短回文重复及相关失活蛋白(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/dead CRISPR-associated protein9，CRISPR/dCas9)技术，构建恶性疟原虫PfMAg-1低表达及过表达质粒，转染恶性疟原虫后分别筛选出恶性疟原虫低表达株(MAg1-KD)虫株及过表达虫株(MAg1-OE)。经PCR、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测PfMAg-1的表达水平。并在体外培养条件下观察MAg1-KD虫株与MAg1-OE虫株生长趋势及裂殖子入侵效率。研究结果表明，1）恶性疟原虫MAg1-KD虫株较对照虫株的体外生长率显著降低，进一步实验提示影响疟原虫增殖速度的原因是MAg1-KD虫株裂殖子入侵效率下降;2）过表达PfMAg-1的MAg1-OE虫株较对照虫株的体外增殖速率明显升高，进一步实验提示影响疟原虫增殖速度的原因与MAg1-OE虫株裂殖子入侵效率升高有关。此外，经对MAg1-KD虫株进行转录组测序发现，两虫株中差异表达的基因多属于编码感染红细胞表面抗原的多变基因家族var家族及rifin家族，鉴于var和rifin基因表达产物在疟原虫的粘附、入侵等方面均发挥了重要作用，提示PfMAg-1可能参与了以上基因家族的致病过程。本研究为进一步评价PfMAg-1蛋白作为疟疾疫苗候选抗原或抗疟药物靶点的研究提供了重要的实验依据。
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