人肝细胞恶性转化的蛋白质组学研究

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原发性肝癌发病率在人类恶性肿瘤中排名第五,是一类严重危害人类生命健康的疾病.该研究采用表达HCVNS3 N端多肽的真核表达质粒(pRcHCNS3-5')和相应的空白质粒(pRcCMV)通过脂质体介导分别转染永生化的正常人肝细胞L02和猴肾上皮细胞COS7,G418筛选后,挑选其阳性克隆用Western Blotting检测两种转染细胞NS3表达,结果显示转染了HCVNS3-5'基因的L02及COS7细胞克隆有一条与NS3蛋白分子量相同的30KD电泳带,成功建立了稳定表达HCVNS3-5'基因的L02和COS7细胞系(L02NS3、COS7NS3),以及空白质粒pRcCMV转染的对照组细胞系(L02Vec、COS7Vec).然后对上述细胞系的生物学特性进行了观察该研究证实HCVNS3能恶性转化正常人肝细胞L02和猴肾上皮细胞COS7,为研究HCV致人肝细胞癌作用及其机制提供了更直接的有力证据和体外模型.该研究识别鉴定的HCVNS3转化人肝细胞与对照组细胞之间的差异表达蛋白质,不仅从蛋白质组水平揭示了HCVNS3致HCC的分子机制,而且为筛选新的肝癌早期诊断标志物提供了有价值的资料.
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