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第一部分奥曲肽对兔肝缺血再灌注损伤血流动力学、血液生化及炎性细胞因子的影响目的：观察奥曲肽对兔肝脏缺血再灌注损伤后血流动力学、血清酶学及炎性细胞因子的影响，以探讨其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法：采用Pringle’s兔肝脏缺血再灌注模型，将24只新西兰大白兔随机分为3组：假手术组（A组）、肝脏缺血再灌注组（B组）和奥曲肽预适应组（C组）。观察三组动物肝门阻断前（T1）、阻断后15min（T2）、30min（T3）、再灌注15min（T4）、30min（T5）、60min（T6）、120min（T7）、240min（T8）平均动脉压（MAP）和心率（HR）变化；T1、T3、T5、T6、T7、T8各时点丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、内毒素（ETX）以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）的变化。结果：1．从缺血15min至再灌注60min各时点B组MAP、HR明显低于A组（P＜0.01），从缺血15min至再灌注15minC组MAP和HR明显低于A组（P＜0.01），从缺血15min至再灌注60min C组又明显高于B组（P＜0.05，P＜0.01）。2．从缺血30min开始各时点B组、C组ALT、AST、LDH均显著高于A组（P＜0.05或p＜0.01），再灌后120min达高峰，而C组又低于B组（P＜0.05或p＜0.01）；从缺血30min开始B、C组血浆ETX与A组比较明显升高（P＜0.05或P＜0.01），C组明显低于B组（P＜0.01）。3．从缺血30min开始，B组血浆TNF—α明显高于A组（P＜0.05，p＜0.01），再灌注60分达高峰，从再灌注30min开始C组血浆TNF—α明显高于A组（P＜0.05，p＜0.01），从缺血30min开始C组血浆TNF—α明显明显低于B组（P＜0.05，p＜0.01）；从缺血30min开始，B组血浆IL-1β明显高于A组（p＜0.01），从缺血30min开始至再灌注120分C组血浆IL-1β明显高于A组（P＜0.05，p＜0.01），再灌时各时点C组血浆IL-1β又都明显低于B组（P＜0.05，p＜0.01）。结论：1．奥曲肽对兔肝脏缺血再灌损伤有明显的保护作用。2．奥曲肽对兔肝脏缺血再灌损伤的保护作用涉及两个方面：（1）直接的肝细胞保护；（2）下调TNFα、IL-1β等炎症介质和降低血浆中内毒素水平。第二部分奥曲肽对兔肝缺血再灌注损伤病理形态学、细胞超微结构及细胞凋亡的影响目的：观察奥曲肽对兔肝脏缺血再灌注损伤后肝组织病理形态学、细胞凋亡及凋亡调节蛋白Bcl-2／Bax的影响，进一步明确其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机理。方法：采用Pringle’s肝脏缺血再灌注模型，将96只新西兰大白兔随机分为三大组：假手术组（A组）、肝脏缺血再灌注组（B组）和奥曲肽预适应组（C组），A、B、C三大组根据不同的再灌注时间（30min、60min、120min、240min）又分为AⅠ、AⅡ、AⅢ、AⅣ，BⅠ、BⅡ、BⅢ、BⅣ和CⅠ、CⅡ、CⅢ、CⅣ亚组，光镜观察各亚组病理形态学变化，透射电镜观察AⅢ、BⅢ、CⅢ组肝细胞超微结构变化，TUNEL法及流式细胞仪检测AⅢ、BⅢ、CⅢ组肝细胞凋亡，免疫组化检测AⅢ、BⅢ、CⅢ组细胞凋亡调节蛋白Bcl-2／Bax在肝细胞中的表达。结果：1．光镜下可见采用奥曲肽预适应的C组各亚组损伤均明显较B组轻微，B组损伤最严重的是再灌注120分钟组和240分钟组（BⅢ组、BⅣ组）。2．透射电镜下可见CⅢ组亚细胞结构损伤明显较BⅢ组轻微。3．TUNEL法及流式细胞仪检测的细胞凋亡CⅢ组明显少于BⅢ组。4．CⅢ组凋亡调节蛋白表达Bcl-2明显高于BⅢ组，Bax明显低于BⅢ组。结论：1．奥曲肽能明显减轻肝脏缺血再灌注损伤病理形态学和细胞超微结构的改变，抑制肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞凋亡，上调抑凋亡蛋白Bcl-2，下调促凋亡蛋白Bax，表明奥曲肽对肝脏缺血再灌注损伤有明显的保护作用。2．奥曲肽对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用是通过线粒体Bcl-2／Bax凋亡通路介导的。第三部分奥曲肽对兔肝缺血再灌注损伤蛋白质表达的影响目的：建立假手术组、肝缺血再灌注损伤组及奥曲肽预适应组兔肝组织双向凝胶电泳图谱，并加以分析验证，以进一步明确奥曲肽对肝缺血再灌注损伤保护的作用机制。方法：采用Pringle’s肝脏缺血再灌注模型，将24只新西兰大白兔随机分为三组：假手术组（A组）、肝脏缺血再灌注组（B组）和奥曲肽预适应组（C组），三组均在缺血30min再灌注120min取肝组织；用双向凝胶电泳技术分离三组肝组织总蛋白，经双向凝胶电泳、考马斯亮蓝染色、Image Scanner扫描仪扫描获得双向凝胶电泳图谱；PDQest图像分析软件分析差异蛋白质点，采用MALDI-TOF-MS鉴定，获取肽质量指纹图谱，分析相关蛋白质；并采用Western blot对差异表达明显的蛋白质进行验证。结果：1．获得了背景清晰、重复性好的双向凝胶电泳图谱，经PDQuest 2DE软件分析，共获得31个有明显差异的蛋白质斑点，其中20个蛋白质斑点在B组表达上调，17个蛋白质点斑在C组表达上调，7个蛋白质斑点在B组表达下调，11个蛋白质斑点在C组表达下调。2．对31个蛋白质斑点进行MALDI-TOF-MS质谱分析鉴定，得到16个蛋白质结果，主要为与线粒体有关的代谢酶、分子伴侣、抗凋亡蛋白以及与细胞结构、信号转导及转录翻译相关的蛋白质与启动子。3．Western blot方法验证了差异明显的HSP70、HSP27的表达水平。结果显示：HSP70和HSP27表达水平在B、C两组均明显上调，且C组上调幅度更大，结果与比较蛋白质组学研究的结果一致。结论：奥曲肽对肝脏缺血再灌注损伤的保护机制是复杂的，涉及多个蛋白质的表达变化。奥曲肽主要通过调控线粒体相关的代谢酶如尼克酰胺腺嘌呤二核甘酸氧化还原酶和磷酸丙糖异构酶，增加抗损伤性物质如HSP70、HSP27等的生成及明显上调磷脂酰乙醇胺绑定蛋白从而抑制细胞分泌、调控细胞凋亡而发挥对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。仍有许多与此相关的蛋白质表达改变有待进一步研究证实。