论文部分内容阅读
目的:观察不同类型的黄酮类化合物(Flavonoids)山萘酚(KA:3,5,7,4-四羟基黄酮)、芹菜素(AP;5,7,4-三羟基黄烷酮)、大豆黄素(DA;7,4-二羟基异黄酮)、红花黄色素A(HSYA;查耳酮类)对H<,2>O<,2>诱导的心肌细胞凋亡及Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响。
方法:取Waster大鼠新生1-3天的乳鼠心肌细胞做原代培养,48h后作试验。制备H<,2>O<,2>诱导的心肌细胞凋亡模型,细胞随机分为空白对照组、H<,2>O<,2>诱导凋亡组、四种药物预孵育+H<,2>O<,2>组。MTT法检测四种黄酮适宜的试验浓度,Tunel法,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化方法检测Bc1-2,gax,Caspase-3蛋白表达。
结果:MTT法显示各组药物在5,30μmol/L与空白组相比没有显著性差异(P<0.05)。进一步实验,加药后1h100μmol/LH<,2>O<,2>孵育16h,30μmol/L浓度给药组细胞活力显著高于100μmol/LH<,2>O<,2>诱导凋亡组(P<0.05),与模型组相比5、15μmol/L浓度给药组细胞活力表现不均衡。Tunel法检测细胞凋亡率,除红花黄色素A(vs模型组:P>0.05)外,各药物组细胞凋亡率均显著小于H<,2>O<,2>诱导组(P<0.05),其中黄酮醇类化合物山萘酚凋亡率最低:流式细胞术实验中各药物组与模型组相比,细胞凋亡率、坏死率均不同程度减少。免疫组化方法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,与凋亡组相比Caspase-3蛋白阳性表达山萘酚、大豆苷元和芹菜素均有显著性差异(P<0.05),其中山萘酚最少,红花黄色素A与模型组相比无显著差异(P>0.05);Bcl-2/Bax比值山萘酚、大豆苷元和芹菜素与凋亡组相比均有显著性差异(P<0.05)其中山萘酚Bcl-2/Bax比值最高、红花黄色素A与模型组相比无显著差异(P>0.05)。这一结果与Caspase-3蛋白阳性表达试验一致。
结论:几种黄酮除红花黄色素A外均有抑制H<,2>O<,2>诱导的心肌细胞凋亡,调节Bcl02,Bax,Caspase-3蛋白表达,起到心肌细胞保护作用。其中黄酮醇类山萘酚与模型组相比差异最显著。