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研究背景及意义： 病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）是一种与病毒严重感染有关的心肌疾病，它主要以心肌细胞炎性病变为主要症状，病毒性心肌炎在儿童及青壮年中发病率很高，并且随着现代检测技术的快速发展，发现有很多种病毒都可引起心肌炎，但柯萨奇病毒B3(coxsackievirusB3，CVB3)感染所引起的VMC占总VMC发病率的将近一半。CVB3是一种正链的RNA病毒，属于小RNA病毒科，肠道病毒属。病毒性心肌炎轻者几乎没有症状，病情严重者可出现心脏容积扩大、心律失常、休克等严重临床症状，甚至有可能猝死。其发病机制还不明确，目前临床上还没有针对此类病毒感染所致的心肌炎病的特效治疗药物，因此，这便使得研究开发既安全又有效的抗 CVB3的药物来造福人类变得极为重要。 A109已确认是一种新的核苷类似物。目前尚无关于其抗病毒活性的研究报告。本研究通过构建病毒性心肌炎体外细胞模型，对A109的体外抗CVB3活性进行研究，并观察 A109对 CVB3感染后宿主细胞凋亡情况的影响，初步探讨A109抗CVB3的作用及其机制，为将来应用于临床提供科学的理论依据。 方法： 第一部分:药效学研究 以CVB3来侵染生长状态良好（对数生长期最佳）的Hela细胞建立病毒性心肌炎的体外细胞模型。由倒置显微镜下观察细胞的病变情况，及利用 MTT法来检测A109对Hela细胞的毒性及其体外抗CVB3的活性；利用终点稀释法测病毒TCID50。 第二部分:机制研究 以CVB3来侵染生长状态良好（对数生长期最佳）的Hela细胞建立病毒性心肌炎的体外细胞模型。应用流式细胞仪通过 AnniexinV/PI结合染色法检测细胞凋亡率；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹实验（Western Blot）法检测A109对CVB3感染细胞所致细胞凋亡的相关基因（bcl-2、病毒衣壳蛋白VP-1、caspase-3）及其蛋白表达水平的影响。 结果： 第一部分:药效学研究 A109对Hela细胞的半数毒性浓度（TC50）为993.34μmol·L-1，半数抑制浓度（IC50）为116.61μmol·L-1，TI为8.56。阳性药物病毒唑组的半数毒性浓度TC50为2.95μmol·L-1，半数抑制浓度IC50为0.77μmol·L-1，TI为3.83。 第二部分:机制研究 （1）流式细胞仪的实验检测结果表明A109能够使CVB3感染Hela细胞后的凋亡率明显下降。 （2）经Real-time PCR、Western-blot的实验检测，结果显示A109能在基因水平上抑制CVB3感染Hela细胞后凋亡因子caspase-3和病毒VP1的表达，促进 bcl-2的表达；并能在蛋白水平上抑制 CVB3感染 Hela细胞后凋亡因子caspase-3的表达，促进bcl-2的表达。 结论： （1）A109在体外细胞模型中具有明显的抗CVB3活性和保护细胞的作用。 （2）A109能明显减轻CVB3感染所致的细胞病变。 （3）A109抗CVB3的主要机制可能与对CVB3感染所致Hela细胞的凋亡的抑制作用有关，并且实验结果表明其可在基因水平上抑制凋亡相关因子caspase-3和病毒VP1的表达，促进bcl-2的表达；并且在蛋白水平上抑制caspase-3的表达，促进bcl-2的表达。