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目的:本研究在继承丁樱教授诊治IgAN(IgA肾病)血尿的临床经验基础上,对血尿停颗粒治疗IgAN血尿的作用机理进行了较为深入的研究。观察血尿停颗粒对IgAN模型大鼠尿红细胞镜检、尿蛋白定性、24h尿蛋白定量、血生化等常规指标的影响,对肾小球ECM(细胞外基质)蛋白的降解酶——MMP-9mRNA(基质金属蛋白酶9信使核糖核酸)及其组织抑制因子TIMP-1mRNA(基质金属蛋白酶组织抑制因子1信使核糖核酸)表达的影响。证实血尿停颗粒对IgAN模型的疗效,进一步阐明血尿停颗粒的疗效机制,探索其疗效的分子生物学基础,阐明中医药治疗IgAN血尿或伴蛋白尿的有效性,深入研究抑制系膜增生的靶环节。
方法:本实验以雄性Wistar大鼠为研究对象,采用隔日口服BSA(牛血清白蛋白)酸化水并尾静脉注射BSA及SEB(葡萄球菌肠毒素B)的方法复制模型[1][2]。观察血尿停颗粒剂对实验性IgAN大鼠血尿、蛋白尿、肾功能的影响;ISH(原位分子杂交)方法检测实验性IgAN大鼠肾组织中MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA的表达情况。
结果:①模型组尿红细胞、24小时尿蛋白定量、Scr(血肌酐)、BUN(尿素氮)同正常组相比较均有极其显著的升高(P<0.01);中药+雷公藤组、中高组治疗6周后上述各项指标均有明显下降,与空白组相比无显著性差异(P>0.05)。②模型组肾组织中MMP-9mRNA表达明显增强,与空白组相比较有显著性差异(P<0.05);中药+雷公藤组、中高组、雷公藤组与空白组相比无差异(P>0.05),但与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。③模型组肾组织中TIMP-1mRNA表达较空白组明显增强;治疗后各组表达均减少,尤以中药+雷公藤组、中高组、雷公藤组明显。但各组数据无显著性差异(P>0.05),考虑为TIMP-1mRNA在本次IgAN大鼠复制模型肾组织中表达较低所致。
结论:血尿停颗粒能明显改善IgAN大鼠血尿情况,减少24小时尿蛋白定量,对肾功能有一定的保护作用,并能改善肾脏病理,抑制MC(系膜细胞)和基质的增生。血尿停颗粒能够降低肾组织中MMP-9mRNA和TIMP-1mRNA异常增高的水平,从而对IgAN有显著的治疗作用。本研究结果为血尿停颗粒的进一步推广应用提供了科学理论依据。