【摘 要】
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p53基因是个抑癌基因。人p53基因位于染色体17P，编码一个核磷酸蛋白p53。p53的主要功能是通过对细胞周期和细胞凋亡的调控来维持整个基因组的完整性。由于在很多癌症中都发现
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p53基因是个抑癌基因。人p53基因位于染色体17P，编码一个核磷酸蛋白p53。p53的主要功能是通过对细胞周期和细胞凋亡的调控来维持整个基因组的完整性。由于在很多癌症中都发现了p53基因的突变，所以p53成为癌症治疗的热点之一。在本实验中，来自TAT蛋白的具有转导功能的11个氨基酸被融合到了p53的N端，重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，并把该融合蛋白命名为His-TAT-p53。经过优化，蛋白表达量达到总蛋白量的5.5﹪。由于大部分融合蛋白His-TAT-p53以包涵体的形式存在，所以采用了变性纯化的方法，通过Ni2+亲和层析得到纯度90﹪以上的His-TAT-p53。His-TAT-p53在人骨肉瘤细胞系Saos-2中的转导能力以及对细胞周期的影响通过免疫荧光技术、MTT染色法和流式细胞技术进行检测。结果显示His-TAT-p53能够快速跨膜进入胞内，定位于细胞核，同时引起了细胞周期G2期的延长和显著的细胞凋亡现象。
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