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目的:探讨硫化氢对肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用并初步研究其机制。方法:64只SD大鼠通过胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,从存活大鼠中随机取32只大鼠随机分为4组:包括①假手术组(Sham组),②肝脏缺血再灌注损伤组(HIRI组),③NaHS预处理组(NaHS组),④NaHS预处理+PI3K抑制剂组(LY294002组),通过Pringle法阻断肝门30min及恢复灌注4h引发肝脏缺血再灌注损伤。①Sham组:仅开腹显露肝蒂,不阻断血流。②HIRI组:开腹显露肝蒂,应用Pringle法行肝门阻断,使肝脏缺血30min,后开放肝门,使肝脏恢复灌注4h。③NaHS处理组于HIRI前30min经腹腔注射NaHS42umol/kg,随后处理同HIRI组。④LY294002组于HIRI前1h经尾静脉注射LY294002 10umol/kg,于HIRI 4h后处死大鼠,分别取血液及肝组织,测血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆红素水平;测定肝组织MDA水平、SOD水平;取左肝外叶组织,透射电镜观察细胞内自噬体形态及数量;取左肝外叶组织,制成10%组织匀浆。应用Western Blot技术检测各组细胞自噬特异性标记蛋Beclin1、LC3B以及AKt蛋白表达水平的变化。结果:1:肝纤维化大鼠动物模型的建立:取各实验组大鼠血清,检测总胆红素(tbil)、直接胆红素(dbil)、谷草转氨酶(ast)、谷丙转氨酶(alt)水平,分别与假手术组之间进行比较,检测发现结扎组tbil、dbil、ast、alt较正常大鼠均显著升高(p<0.05),肝组织切片masson染色病理学镜检,结扎18天组大鼠大部分处于肝纤维化Ⅲ期阶段。2:生化指标检测:与假手术对比,各组谷草转氨酶水平均显著升高(p<0.05),其中nahs组及ly294002组较hiri组损伤减轻(p<0.05),ly294002组相比nahs组损伤加重(p<0.05)。3:mda水平及sod水平检测:在肝纤维化大鼠缺血再灌注4h后,与假手术组对比,各组sod水平均显著降低(p<0.05),其中hiri组降低最明显,各组mda水平均显著升高(p<0.05);nahs组及ly294002组较hiri组sod水平高(p<0.05),mda水平低(p<0.05);ly294002组相比nahs组sod水平低(p<0.05),mda水平高(p<0.05)。4:自噬指标检测:1)自噬体的检测:与假手术组对比,电子显微镜检查发现各组自噬体均较假手术组增多,nahs预处理组相比hiri组自噬体数量较少,ly294002组相比nahs预处理组自噬体数量增多;2)beclin1、lc3b以及akt蛋白的表达情况:与假手术组对比,各组beclin1表达水平均升高(p<0.05),nahs预处理组与hiri组比较其beclin1表达水平减低(p<0.05),ly294002干预组相比nahs预处理组其beclin1表达水平增高(p<0.05);与假手术组相比,各组LC3B表达水平均升高(P<0.05),NaHS预处理组与HIRI组比较其LC3B表达水平减低(p<0.05),LY294002干预组相比NaHS预处理组其LC3B表达水平增高,差异具有显著统计学意义(p<0.05);与假手术组对比,HIRI组Akt蛋白表达水平没有显著差别(P<0.05),NaHS预处理组与HIRI组比较Akt蛋白表达水平升高(P<0.05),LY294002干预组相比NaHS预处理组其Akt表达水平降低,差异具有显著统计学意义(p<0.05)。结论:1、外源性硫化氢能够减轻肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤。2、外源性硫化氢可能通过降低氧化应激发挥肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用。3、外源性硫化氢发挥肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护机制之一可能是通过PI3K/Akt信号通路抑制细胞自噬作用来实现的。